大肠杆菌磷酸丝氨酸转氨酶基因的克隆和在黄色短杆菌中的表达

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磷酸丝氨酸转氨酶(Phosphoserine aminotransferase,SerB)是L-丝氨酸生物合成途径中的关键酶之一,它能催化3-磷酸羟基丙酮酸与谷氨酸反应生成磷酸丝氨酸和α-酮戊二酸,从而参与L-丝氨酸的生物合成。本研究应用PCR技术从大肠杆菌JM109(E.coli JM109)中扩增出磷酸丝氨酸转氨酶基因,将其与表达载体pEC 7连接。通过电转化方法,将重组质粒转入黄色短杆菌(Brevibacterium flavum C-11,BfC-11)中,经酶活性检测和摇瓶发酵培养,含有重组表达质粒的BfC-11B的磷酸丝氨酸转氨酶的活力比原宿主菌BfC-11提高了57.06%,L-丝氨酸产率比原宿主菌BfC-11提高了16.7%,为构建L-丝氨酸高产基因工程菌的研究奠定了基础。
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