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目的:探讨姜黄素与5-FU联合使用对粘液表皮样癌MEC-1细胞的凋亡效应及NF-κB、caspase-3蛋白表达的影响。为姜黄素与5-FU联合使用对粘液表皮样癌的治疗上提供一定的理论依据。方法:实验组分为姜黄素组、5-FU组、联合组,对照组为含有0.1%DMSO的PBS组。将MEC-1细胞置于含10%胎牛血清及1%双抗的RPMI-1640培养液,37℃、5%CO2培养箱中培养,并进行传代,待肿瘤细胞处于对数生长期时备用。(1)不同浓度姜黄素(0、20、40、60、80、120μmol//L)孵育MEC-1细胞不同时间(24、48、72h)后,用CCΚ-8检测细胞增殖抑制率。(2)同样,不同浓度5-FU(0、20、40、60、80、120μmol/L)孵育MEC-1细胞24h后,用CCΚ-8检测细胞增殖抑制率,通过实验结果计算出姜黄素、5-FU 24h的IC50值用于后续各项实验。(3)姜黄素和5-FU单独及联合作用于粘液表皮样癌MEC-1细胞24h,CCΚ-8法检测肿瘤细胞体外增殖抑制情况。(4)加入不同浓度(20、40、60μmol/L)的姜黄素、5-FU、姜黄素+5-FU孵育MEC-1细胞,培养12、24h后用流式细胞仪进行凋亡的检测。(5)加入34.79μmol/L浓度的姜黄素和104.6μmol/L浓度的5-FU单独及联合作用于MEC-1细胞24h后,Western bolt测定NF-κB、caspase-3蛋白表达水平变化。结果:(1)不同的浓度作用下,实验组与对照组对MEC-1细胞增殖作用的比较,差异有统计学意义(F组间=719.378,P组间<0.01)。随着作用时间增加,姜黄素对MEC-1的细胞增殖抑制作用增强(F时间=203.286,P时间<0.01);姜黄素不同浓度组与时间存在交互效应(F交互=12.650,P交互<0.01),即在不同时间点、不同浓度的姜黄素均对MEC-1细胞生长有抑制作用。(2)随着5-FU浓度升高,对MEC-1细胞的生长抑制作用增强。(3)联合用药组与34.79μmol/L姜黄素、联合用药组与104.6μmol/L 5-FU之间对MEC-1细胞增殖抑制作用的比较,差异具有统计学意义(P<0.05),联合用药比单独用药对MEC-1细胞生长抑制作用更强。(4)各实验组药物均能诱导MEC-1细胞凋亡。随着浓度升高,各药物组诱导MEC-1细胞凋亡作用增强。联合用药组与姜黄素组之间、联合用药组与5-FU组之间对MEC-1细胞诱导凋亡作用比较,差异均具有统计学意义(均P<0.05),联合用药组诱导MEC-1细胞凋亡作用更强。(5)姜黄素与5-FU均能下调NF-κB及上调caspase-3蛋白表达水平,联合用药组下调NF-κB,上调Caspase-3蛋白能力高于单独用药组(P<0.05)。结论:(1)不同浓度的姜黄素、5-FU均能有效抑制MEC-1细胞的增殖和诱导MEC-1细胞的凋亡,联合用药比单独用药对MEC-1细胞生长抑制及诱导凋亡作用更强。(2)姜黄素与5-FU联合使用能够有效的抑制MEC-1细胞的增殖,促进MEC-1细胞凋亡,其作用机制可能通过抑制NF-κB活性,上调caspase-3表达有关。