渔源乳酸菌筛选及其对大菱鲆养殖水质和免疫相关基因表达的影响

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为了获得具有替代抗生素潜力的益生菌,本研究从大菱鲆(Scophthalmus maximus)肠道中分离得到一株产酸型菌株(HY2),对分离的菌株进行分子生物学鉴定、病原菌抑菌实验及生物学特性研究。结果证实,经16srDNA技术鉴定,该菌株与肠系膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroide)具有高的同源性,同时,经过抑菌实验确定该菌株为抑菌型乳酸菌,生物学特性研究表明,肠系膜明串珠菌具有一定的产乳酸能力和稳定的超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时该菌株对低pH、高胆盐和胃蛋白酶及高温具有一定的耐受性。
  开展为期30d的大菱鲆养殖实验,分别从大菱鲆养殖水环境和大菱鲆相关免疫基因表达及鳗弧菌攻毒实验全面评估获得菌株(肠系膜明串珠菌)的作用效果。在大菱鲆养殖水体中加入肠系膜明串珠菌菌液,分四个时间点对大菱鲆养殖水体中氨氮、硝酸氮和亚硝酸氮进行检测。结果显示,肠系膜明串珠菌对大菱鲆养殖水体中的氨氮、硝酸氮、亚硝酸氮均有明显的处理效果。大菱鲆进行肠系膜明串珠菌的浸泡处理后,对6个组织(肠、肝、脾、肾、脑和皮)2个时间点的每个RNA样品进行荧光定量,比较对照组基因的表达量倍数,分析各个免疫基因的差异表达。通过大菱鲆进行肠系膜明串珠菌浸泡免疫处理,结果分析显示,肠系膜明串珠菌对大菱鲆进行浸泡免疫均能使3种免疫相关基因显著表达,说明肠系膜明串珠菌有效的引起了大菱鲆免疫反应且这3种基因参与了肠系膜明串珠菌引起的免疫应答。乳酸菌浸泡实验结束后,用鳗弧菌进行攻毒实验,结果显示,攻毒实验开始48h后,实验组大菱鲆存活数量明显高于对照组大菱鲆存活数。
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