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目的:探讨注射用紫杉醇脂质体对人子宫颈癌HeLa细胞增殖及其claudin-1、claudin-7蛋白表达水平的影响。
方法:人子宫颈癌HeLa细胞常规培养于含10%小牛血清、100U/ml青霉素和80U/ml链霉素的DMEM培养液中,在37℃、5%CO2及饱和湿度培养箱中培养,分别予以紫杉醇脂质体0μmol/L、0.01μmol/L、0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L作用后:1.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测各组细胞24h、48h、72h、96h体外增殖情况;2.免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞用药48h后claudin-1、claudin-7蛋白表达水平。
结果:1.不同浓度的紫杉醇脂质体作用于HeLa细胞24~96h后,细胞增殖水平明显下降(P<0.05),在浓度为0.01μmol/L时即出现抑制细胞生长的作用,相同作用时间下随着紫杉醇脂质体浓度的增大其抑制效果增强,呈浓度依赖性;相同药物浓度下,随着作用时间的延长,抑制率亦逐渐升高,呈时间依赖性;2.Western Blot显示HeLa细胞经不同浓度的紫杉醇脂质体处理48h后,用药组claudin-1、claudin-7蛋白相对表达量均明显低于对照组(P<0.05);随着紫杉醇脂质体浓度的增高,claudin-1、claudin-7蛋白表达逐渐减弱,组间的差异均具有统计学意义(P<0.05),且成负相关(P<0.01)。
结论:1.紫杉醇脂质体能抑制体外培养的人宫颈癌HeLa细胞增殖,这种抑制作用在一定范围内具有剂量、时间依赖性。2.随着紫杉醇脂质体浓度的升高,claudin-1、claudin-7蛋白在人宫颈癌HeLa细胞中的表达水平呈逐渐下降趋势,且成浓度依赖性。3.紫杉醇脂质体抑制宫颈癌细胞增殖作用可能与紧密连接蛋白claudin-1、claudin-7表达下调有关。