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目的:探索肺腺癌PC9细胞及Balb/c荷瘤裸鼠中联苯双酯与吉非替尼的联合作用效应,并在PC9细胞中探究其可能作用机制,进而探究肺腺癌靶向治疗中医药干预方法。方法:(一)联苯双酯联合吉非替尼作用效应验证:MTT、Soft Agar、Invasion法检测联苯双酯、吉非替尼及两药联合干预分别对PC9细胞活力、增殖、侵袭的抑制作用,同时Western blot检测EGFR下游pAKT的表达水平;将肺腺癌细胞系PC9接种于Balb/c裸鼠颈背部皮下,分别以联苯双酯、吉非替尼、联苯双酯联合吉非替尼灌胃,对照组以0.5%CMC灌胃,观察各组成瘤效应,通过成瘤大小、瘤体重量、抑瘤率、裸鼠生长曲线、瘤体体积增长曲线评估联苯双酯、吉非替尼及两药联合干预的疗效,金正均法判断两药联用效果。(二)联苯双酯与吉非替尼联合作用机制探究:通过数据库分析肺腺癌组织中转录因子CTCF与EGFR基因表达水平及其可能相关性;使用HA-CTCF载体转染PC9细胞,Mock空载对照,ChIP检测转录因子CTCF与EGFR之间的结合及调控关系,同时通过Western blot、PCR验证联苯双酯通过CTCF对EGFR及下游pAKT的表达调控;Western Blot、PCR检测联苯双酯对PC9细胞CTCF的调控;进一步Soft Agar、Invasion法检测联苯双酯与CTCF对PC9细胞增殖、侵袭的调控。结果:1.对比于吉非替尼,联苯双酯联用吉非替尼对肺腺癌细胞系PC9的增殖、侵袭具有明显的抑制作用,同时可下调EGFR信号通路下游关键因子pAKT的表达水平(p<0.01);2.裸鼠皮下成瘤实验中,对比于吉非替尼,联用联苯双酯与吉非替尼,裸鼠皮下瘤瘤体体积缩小、瘤体重量减轻、瘤体生长速度缓慢(p<0.05),二者具有协同作用;3.分析数据库,EGFR基因启动子区域核苷酸序列存在四个位点可与转录因子CTCF上的公共结合位点相结合;肺腺癌组织中转录因子CTCF与EGFR基因的高表达均为肺腺癌的危险因素;4.转染HA-CTCF载体的细胞系PC9中,EGFR表达水平明显升高,使用联苯双酯干预后,CTCF表达水平明显降低,进一步降低EGFR表达水平,同时降低细胞的增殖、侵袭等能力(p<0.01)。结论:1.联苯双酯可增强吉非替尼对肺腺癌PC9细胞功能的抑制及Balb/c荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用;2.PC9细胞中转录因子CTCF可与EGFR基因启动子区域结合,促进EGFR基因表达;3.PC9细胞中联苯双酯可通过抑制转录因子CTCF表达,进一步降低EGFR表达水平,同时吉非替尼抑制EGFR的活化,进而抑制下游信号通路关键因子pAKT的表达水平。