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目的:Dynamin 1是一种与癫痫有关的内吞相关蛋白。当神经元活性增高发生高频放电时,它可以被去磷酸化并介导一种大容量的突触囊泡内吞模式,以适应陡然增高的突触传递压力,调节突触囊泡循环。本研究旨在探讨不同浓度的抑制剂和激动剂干预dynmain 1是否会影响锂-匹鲁卡品诱导的在体大鼠癫痫发作及4-氨基吡啶(4-AP)诱导的离体脑片动作电位(AP)的连续爆发,进一步明确急性癫痫发作后各实验组大鼠海马中dynamin 1及磷酸化dynamin 1蛋白表达水平,以探究不同磷酸化状态的dynamin 1与癫痫发作的关系。方法:本项研究通过侧脑室注射dynamin 1抑制剂dynasore(不同浓度)和激动剂磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP2),观察锂-匹鲁卡品诱导的大鼠癫痫发作模型的行为学变化。采用western blot检测各实验大鼠海马组织中dynamin 1蛋白及磷酸化dynamin 1蛋白表达水平。采用全细胞膜片钳技术研究dynasore(不同浓度)和PIP2对4-AP诱发的大鼠离体脑片持续爆发的动作电位的影响。结果:研究发现在匹鲁卡品诱导的大鼠癫痫发作模型中,100及160μM(中浓度)的dynasore能有效抑制大鼠的癫痫发作:发作率降低,发作潜伏期延长,发作的严重程度减轻;PIP2对大鼠癫痫发作率和潜伏期无影响,但能加重癫痫发作的严重程度。Dynasore能使癫痫发作后大鼠海马中dynamin 1磷酸化水平升高,也以中浓度组升高最明显;但PIP2组海马中dynamin 1的磷酸化水平却无明显改变。研究还发现用4-AP诱导大鼠海马脑片CA1区椎体神经元出现持续爆发的动作电位后,浓度为10及20μM(中浓度)的dynasore能明显减少动作电位频率;但PIP2对动作电位频率无影响。结论:我们的研究发现中浓度dynamin 1抑制剂dynasore能抑制体内匹鲁卡品诱导的大鼠癫痫发作(100、160μM),和体外4-AP诱发的脑片动作电位的持续爆发(10、20μM),激动剂PIP2能加重大鼠癫痫发作严重程度。100、160μM(中浓度)的dynasore还可升高急性癫痫发作后大鼠脑组织内磷酸化dynamin 1蛋白水平而不是总的dynamin 1蛋白水平。然而激动剂PIP2的使用却未能对dynamin 1的表达产生影响。这些结果表明dynamin 1的磷酸化状态与癫痫发作密切相关,一定范围内抑制dynamin 1的活性可能改变其磷酸化和去磷酸化蛋白的表达水平,进而影响突触囊泡内吞,导致神经元兴奋性改变,最终调节癫痫发作的进程。