背景与目的：乳腺癌是严重威胁女性身心健康的重大疾病，并且是导致女性死于癌症的最重要原因，其新发病例数和死亡病例数呈逐年递增趋势。目前全球女性乳腺癌发病率占癌症总发病人数的11.6％，仅次于肺癌（18.4%）。在乳腺癌中,雌激素受体ɑ（estrogenreceptoralpha,ER-ɑ）不仅是分子分型的生物标记，也是最重要的内分泌治疗的靶点，并且被认为是影响乳腺癌预后的重要因素之一。目前在临床中，以使用他莫昔芬为主的内分泌治疗，能明显的改善患者的预后，然而有部分患者在治疗过程中因为获得性耐药或者先天性耐药，导致了预后不良。ER-ɑ的缺失或者下调是导致内分泌治疗抵抗的主要分子机制之一。Slug是具有锌指结构的Snail超家族成员之一，又称snai2。Slug在三阴性乳腺肿瘤中可以转录下调ER-ɑ的表达，是介导上皮间质转化（Epithelial-mesenchymaltransition，EMT）的重要始动因素之一。DNA甲基化转移酶3B（DNAmethyltransferase3B,DNMT3B）属于从头甲基转移酶,它可使DNA的CpG半甲基化,继而全甲基化。ER-ɑ启动子的甲基化是ER-ɑ下调的原因之一，因此DNMT3B可能参与下调乳腺癌ER-ɑ并介导了其他莫昔芬耐药。在本论文中，我们主要在ER阳性乳腺癌中研究了Slug与ER-ɑ的表达关系，Slug调控ER-ɑ的机制，Slug/DNMT3B复合物对ER-ɑ的调控作用。
　　材料和方法：
　　1)利用TheCancerGenomeAtlas（TCGA）数据库中病人组织标本的ER-ɑ甲基化数据和ER-ɑ蛋白表达数据，以及CancerCellLineEncyclopedia（CCLE）数据库中乳腺癌细胞系ER-ɑ甲基化数据和Slug蛋白表达数据，分析ER-ɑ蛋白与ER-ɑ甲基化的相关性，ER-ɑ蛋白和Slug蛋白的相关性。
　　2)利用生信手段预测ESR1启动子上的CpG岛，以及Slug在ESR1上的潜在结合位点。
　　3)利用双荧光素酶报告基因实验研究Slug对ESR1启动子活性的影响。利用染色质免疫共沉淀（ChromatinImmunoprecipitation，ChIP）的方法探究Slug在ESR1启动子的结合情况。进一步在MCF7及其稳定过表达Slug的细胞株MCF7-Slug中研究DNMT3B在ESR1启动子结合情况的变化。
　　4)利用免疫共沉淀的方法探究Slug和DNMT3B的结合情况及Slug的SNAG区域对于此结合的重要性。
　　5)利用挽救实验探讨了Slug和DNMT3B对MCF7的ER-ɑ蛋白表达的影响。
　　结果：
　　1)通过TCGA公共数据库分析，乳腺癌标本中ER-ɑ甲基化水平与ER-ɑmRNA水平呈负相关。通过CCLE数据库分析，乳腺癌细胞系ER-ɑ甲基化水平与ER-ɑmRNA水平呈负相关，乳腺癌细胞系SlugmRNA水平与ER-ɑmRNA水平呈负相关。
　　2)预测得到ESR1启动子上存在CpG岛，以及Slug在ESR1启动子上存在7个潜在结合位点。其中第5、6位结合位点位于CpG岛上
　　3)双荧光素酶报告基因显示Slug可以抑制ER-ɑ的转录活性，这种抑制作用依赖于SNAG区，并且敲减DNMT3B可以减弱这种抑制作用。
　　4)ChIP实验证实Slug可以结合到MCF7中ESR1的第1、2、4、5、6和7号潜在结合位点，并且过表达Slug可以促进DNMT3B结合到第4和6结合位点上。
　　5)挽救实验证实在MCF7中，单独过表达slug，可引起ER-ɑ下调，同时过表达Slug和干扰DNMT3B时，ER-ɑ的蛋白表达水平可以恢复。
　　结论：我们的研究发现了在乳腺癌中全新的Slug调控ER-ɑ的机制。Slug通过招募DNMT3B，结合在ESR1启动子上，促进了其基因组甲基化，阻碍ESR1的转录，进而可能介导他莫昔芬耐药。