基于[Fe(CN)<,6>]<'3-/4->的巯基修饰DNA的电化学检测方法的研究

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[Fe(CN)<,6>]<3-/4->是一对被广为研究的氧化还原离子对,尤其是在电化学领域,它们是一对应用广泛的电化学活性指示剂。[Fe(CN)<,6>]<3-/4->体系的电化学反应机理是相当复杂的,体系中的阳离子对其有着一定的催化作用。在较低离子强度下,很难观察到[Fe(CN)<,6>]<3-/4->的电化学活性。 本文通过自行设计出纳米金薄膜电极工艺参数基础上,获得了能适用于DNA传感器上的具备稳定、优越性能的纳米金薄膜电极。通过实验分析,确定以10mM的K<,3>[Fe(CN)<,6>]<3-/4->为。DNA检测的指示剂。优化了[Fe(CN)<,6>]<3-/4->在巯基化修饰DNA电极上的电化学检测的实验条件,包括巯基化DNA的最佳自组装时间和最佳自组装浓度。同时探究了离子强度对[Fe(CN)<,6>]<3-/4->在空白金电极和DNA修饰电极的电化学行为的影响,发现在低离子强度下,固定在金电极表面的HS-ssDNA对[Fe(CN)<,6>]<3-/4->有电催化作用,从而研究出一种新颖的巯基化DNA的电化学检测方法。该方法是在低离子强度下,通过检测。DNA在自组装前后和杂交前后引起的[Fe(CN)<,6>]<3-/4->电化学信号的差别,来达到检测固定在金薄膜电极上的ssDNA、dsDNA序列和微量互补链DNA的半定量检测。并在此实验基础上,通过改变实验条件对此现象的机理进行可行的推测。
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