论文部分内容阅读
热应激致使肉鸡生长与繁殖性能降低、抗氧化能力下降,对病原菌的易感性增加,给肉鸡产业造成了巨大经济损失。色氨酸（Tryptophan,Trp）可作为功能性氨基酸参与肉鸡抗应激、抗氧化、采食量及免疫功能的调节,然而有关色氨酸对热应激肉鸡的功效知之甚少。本研究拟以爱拔益加（Arbor Acres,AA）肉鸡为试验对象,旨在探讨饲粮添加色氨酸对热应激肉鸡抗氧化能力、线粒体功能和炎症反应的影响。选取350只1日龄雌性AA肉仔鸡,常规饲养至18日龄,从中选取300只健康、体重相近（481.50±26.68 g）的仔鸡,随机分为5个处理组,适温组（Thermoneutral group,TN）和热应激组（Heat stress group,HS）均饲喂基础日粮;另外三个组分别饲喂添加0.09%、0.18%和0.27%Trp（HS+0.09%/0.18%/0.27%Trp）的试验饲粮,每组6个重复,每个重复10只鸡。适温饲养至21日龄,进行21天的温度控制,TN组肉鸡饲养于适宜温度（23±1℃）,其余四组肉鸡饲养于高热环境（21-22天:34±1℃,24小时;22-42天:34±1℃,8小时/天）。分别于试验第1天（22日龄）与21天（42日龄）后,从每个重复中随机选取1只肉鸡,空腹采血后屠宰,采集肝脏、空肠与回肠黏膜样品。结果得到:1、与TN组相比,热应激处理1天肉鸡血清GLU含量、ALT和AST活性显著升高,但ALB含量显著降低（P＜0.05）;饲粮添加Trp显著提高热应激肉鸡血清TP和ALB含量,降低AST活性（P＜0.01）。热应激处理21天则显著提高肉鸡血清UA含量和NOS活性,降低TP含量（P＜0.05）;饲粮添加Trp明显提高热应激肉鸡血清TP含量,显著降低NOS、AST活性和UA含量（P＜0.05）。与TN组相比,热应激处理1天显著提高肉鸡血清SOD和CAT活性和MDA含量（P＜0.05）;饲粮添加Trp显著降低血清GSH-Px、CAT活性（P＜0.05）,极显著升高SOD活性（P＜0.01）。热应激处理21天血清SOD、T-AOC活性显著降低,MDA含量显著升高（P＜0.05）;饲粮添加Trp显著升高血清抗氧化酶活性,降低MDA含量（P＜0.05）。热应激处理21天,HS组肝细胞排列不规则,细胞轮廓不清晰,肝细胞空泡化,并出现炎性细胞浸润;饲粮添加Trp减少空泡和炎性细胞浸润,其中以HS+0.18%Trp组为最适添加水平。2、与TN组相比,热应激处理1天显著提高肝脏、回肠黏膜抗氧化酶活性及回肠黏膜MDA含量（P＜0.01）;饲粮添加Trp降低肝脏GSH-Px,回肠T-AOC和CAT活性和MDA含量（P＜0.05）,提高肝脏SOD活性（P＜0.01）。热应激处理21天显著降低肉鸡肝脏、肠道抗氧化酶活性,升高肝脏MDA含量（P＜0.05）;添加Trp显著提高肝脏、肠道组织抗氧化能力,降低回肠MDA含量（P＜0.05）。与TN组相比,热应激处理1天显著上调肉鸡肝脏和回肠Nrf2、NQO1、HO-1、Gpx1的mRNA相对表达量（P＜0.05）;然而与HS组相比,添加0.18%Trp无显著性差异（P＞0.05）。热应激处理21天显著升高肝脏和回肠黏膜Nrf2和解毒酶的mRNA相对表达量（P＜0.05）,而极显著降低空肠黏膜SOD1、Gpx1的mRNA相对表达量（P＜0.01）;饲粮添加0.18%Trp进一步激活Nrf2信号通路及下游抗氧化基因。3、与TN组相比,热应激处理1天显著提高线粒体膜电位,降低肝脏mt DNA拷贝数（P＜0.05）;饲粮添加0.18%Trp显著提高回肠mt DNA拷贝数（P＜0.05）。热应激处理21天显著降低空肠黏膜mt DNA拷贝数（P＜0.05）,添加0.18%Trp逆转上述变化。与TN组相比,HS组的线粒体内部密度不均,出现空泡化,嵴部分溶解断裂,细胞核固缩,出现脂肪堆积现象;HS+0.18%Trp组的线粒体形态结构相对完整,损伤现象有所缓解。与TN组相比,热应激处理1天显著降低肝脏和回肠黏膜PGC-1α、Cyt-c、COX5A、SIRT1的mRNA的表达量（P＜0.05）;热应激处理21天显著降低肝脏SIRT1,空肠黏膜NRF1、TFAM,回肠黏膜COX1、COX5A、TFAM的mRNA相对表达量（P＜0.05）,并极显著升高肝脏Cyt-c和空肠SIRT1的mRNA相对表达量（P＜0.01）;饲粮添加0.18%Trp可以逆转以上变化,促进线粒体的生物合成作用。4、与TN组相比,热应激处理1天和21天肉鸡血清和肝脏促炎因子含量和mRNA相对表达量均显著增高（P＜0.05）;而添加0.18%Trp显著降低促炎因子含量（P＜0.05）。热应激处理1天NLRP3、Caspase-1、IL-1β的表达量均无显著变化（P＞0.05）;热应激处理21天显著升高NLRP3、Caspase-1及促炎因子的mRNA表达量（P＜0.05）。与HS组相比,饲粮添加0.18%Trp可逆转上述变化。综上所述,热应激影响肉鸡血清生化指标,破坏氧化还原平衡,引起线粒体功能紊乱,促炎因子分泌增加。本试验条件下,0.18%Trp为最适添加剂量。饲粮添加色氨酸可保护热应激肉鸡肝脏组织结构完整,改善氧化还原反应平衡,缓解线粒体结构与功能损伤;可能机制与其抑制了NLRP3信号通路相关基因mRNA的表达有关。