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第一部分载HMME高分子增效剂的制备及性能检测目的制备载血卟啉单甲醚(Hemato Porphyrin Monomethyl Ether,HMME)的聚乳酸-羟基乙酸(Poly-lactic-co-glycolic acid,PLGA)多功能增效剂(HMME/PLGA),检测其物理学、光学等一般特性;观察HMME/PLGA对卵巢癌SKOV3细胞的相关作用。方法采用双乳化法制备出HMME/PLGA,对其表面形态、内部结构、粒径、电位、包封率及载药量等一般特性进行检测。以CCK8法检验不同超声处理时间(10 s、30 s、60 s、90 s)对卵巢癌SKOV3细胞存活率的影响。实验分为5组:(I)cell(control group),(II)US+cell,(III)US+PLGA+cell,(IV)US+HMME+cell,(Ⅴ)US+HMME/PLGA+cell,治疗参数为(超声辐照声强0.50 W/cm2,频率1MHz,IV组和Ⅴ组HMME浓度20μg/ml)。并于上述细胞毒实验基础上检测卵巢癌SKOV3细胞12 h、24 h、36 h、48 h的存活率。结果HMME/PLGA为较均匀的粉红色乳液,分散度较好。光镜及扫描电镜显示,HMME/PLGA呈球形,形态规则,大小较均匀,透射电镜下可见较多黑色的HMME颗粒分布于外壳结构中。激光共聚焦显示HMME/PLGA表现出强烈的红色荧光。Malvern激光粒径仪检测出HMME/PLGA平均直径为357±0.72 nm(PDI=0.932),Zeta电位为(-7.89m V)m V。紫外-可见分光光度计检测出HMME/PLGA在紫外-可见光区域有一个范围较宽的吸收光谱,除了在418 nm处有一个强的吸收光谱外,另外在500-700 nm之间(分别位于515,549,590,648 nm处)还有4个吸收光谱。HMME/PLGA包封率为(58.33±0.95)%,载药量为(4.73±0.15)%。HMME/PLGA对卵巢癌SKOV3细胞的急性细胞毒及抑制效应实验显示,(Ⅴ)(US+HMME/PLGA+cell)组较其余各组能明显地降低SKOV3细胞的存活率(P<0.05),抑制肿瘤细胞的增殖活性(P<0.05)。结论自制的HMME/PLGA高分子增效剂,形态规则、包封率较高,光学吸收性能良好,对卵巢癌SKOV3细胞有明显的杀伤、抑制功能,是一种有诊疗一体化潜能的新型增效剂。第二部分载HMME高分子增效剂超声/光声显像研究目的观察HMME/PLGA体内外增强超声及光声成像的效果,了解HMME/PLGA增强光声成像的能力及原理。方法体外成像部分以凝胶块作为模型,以光声成像仪分别对同等浓度的PBS、PLGA、HMME及HMME/PLGA进行超声图像检测,另外以波长为690 nm的脉冲激光激发,检测此四种样品的光声信号。以相同的方法对三种不同浓度(0.25 mg/ml,0.50 mg/ml,1.00 mg/ml)的HMME/PLGA进行超声及光声信号的观察。建立裸鼠卵巢癌模型10只,于肿瘤种植后约一个月,随机分为2组,分别经裸鼠尾静脉注入HMME/PLGA 0.2 ml(HMME浓度为1.50 mg/ml),以波长为690 nm的脉冲激光激发,观察其对卵巢癌组织的超声及光声成像效果,了解其在卵巢癌组织的超声、光声信号强度随时间变化的关系等。结果在体外成像实验中,同等浓度的情况下,HMME/PLGA表现出了最强的超声信号,HMME和PLGA的超声信号强度没有明显的差别,PBS的超声信号强度最弱。HMME/PLGA光声信号最强,HMME次之,PLGA和PBS几乎没有光声信号。三种不同浓度的HMME/PLGA,浓度最大者表现出了最强的超声和光声信号,最小者超声及光声信号最弱。在裸鼠体内卵巢癌组织成像实验中,随着激光辐照时间的延长,肿瘤的光声信号不断增强。于同等情况下观察到的肿瘤超声信号虽有增强,但增强效果较不明显。结论HMME/PLGA具有体内外增强超声及光声双模态显像的能力,对卵巢癌的诊断具有潜在的应用价值。第三部分载HMME/PLGA高分子增效剂增效HIFU治疗的研究目的观察HMME/PLGA体内外增效HIFU治疗的效果,探讨其相关增效机制。方法本部分研究分两部分进行。第一部分以离体牛肝作为模型,分为PBS,PLGA,HMME和HMME/PLGA四组。分别注入四组不同样品200μl后(HMME浓度分别为0.25 mg/ml,0.50 mg/ml,1.00 mg/ml),以不同辐照声功率(120 W,150 W,180 W)和不同时间(3 s,5 s,10 s)的HIFU处理,处理后观察靶区灰度值的变化及凝固性坏死的体积、能效因子的不同,评价HMME/PLGA增效HIFU的效果。在第二部分实验中,建立裸鼠卵巢癌模型50只,随机分为HIFU,PBS+HIFU,PLGA+HIFU,HMME+HIFU和HMME/PLGA+HIFU五组。HIFU组给予单纯HIFU辐照,后四组于肿瘤组织分别注射200μl PBS,PLGA,HMME和HMME/PLGA(HMME浓度为1.50 mg/ml)后给予HIFU定点消融,处理参数为120 w、5s。处理结束后观察消融区灰度变化值、凝固性坏死体积和能效因子、超微结构的变化、PCNA、TUNEL等的差别,评价HMME/PLGA增效HIFU治疗肿瘤的效果。结果在第一部分体外实验中,与其余各组相比,HMME/PLGA组在同等实验条件下消融区灰度变化值和凝固性坏死体积最大,能效因子最小(P<0.05)。同样地在第二部分体内实验中,HMME/PLGA+HIFU组消融区灰度变化值及凝固性坏死体积最大,能效因子最小(P<0.05)。微观检测显示,与对照组间相比HMME/PLGA+HIFU组消融区超微结构及PCNA、TUNEL表达差异明显(P<0.05)。结论体内外实验均显示自制载HMME/PLGA高分子增效剂能有效增强HIFU消融的治疗,证明其是一种有潜力的HIFU增效剂。