【摘 要】
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目的:本研究旨在探讨红藤对牛磺胆酸钠（Sodium taurocholate,STC）诱导的重症急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis,SAP）模型大鼠肠黏膜屏障损伤的保护作用机制。方法:将49只大鼠按照随机数字表法分为3组,假手术组（Sham组）,SAP模型组（SAP组）,红藤治疗组（SG组）,其中将SAP组和SG组按6h、12h、24h三个时间节点再随机分为3个亚组,分
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目的:本研究旨在探讨红藤对牛磺胆酸钠（Sodium taurocholate,STC）诱导的重症急性胰腺炎（Severe acute pancreatitis,SAP）模型大鼠肠黏膜屏障损伤的保护作用机制。方法:将49只大鼠按照随机数字表法分为3组,假手术组（Sham组）,SAP模型组（SAP组）,红藤治疗组（SG组）,其中将SAP组和SG组按6h、12h、24h三个时间节点再随机分为3个亚组,分别为SAP6h、SAP12h、SAP24h和SG6h、SG12h、SG24h,每组7只大鼠。采用经十二指肠乳头逆行穿刺胆胰管注射5%的STC溶液（1ml/kg）制备SAP模型,Sham组仅轻微翻动胰腺和十二指肠后关腹。在建立SAP模型后每间隔3h,Sham组和SAP组给予温生理盐水灌肠,SG组给予红藤单药灌肠,各组大鼠在造模给药后的6h、12h、24h时间节点进行麻醉取材。开腹后观察大鼠胰腺及回肠组织变化,包括肠系膜皂化斑,腹水等,迅速从腹主动脉采血,取大鼠胰腺和回肠组织。采用生化分析仪检测血清淀粉酶（AMY）水平,ELISA检测白介素1β（IL-1β）水平,紫外分光光度计测量二胺氧化酶（DAO）水平,HE染色观察胰腺和回肠组织病理学变化,免疫组化检测回肠组织肠黏膜中NF-κBp65和乳脂肪球表皮生长因子8（Milk fat globule epidermal growth factor 8,MFG-E8）蛋白表达情况。结果:（1）造模时可见胰腺组织充血水肿,病理结果显示SAP组的胰腺组织充血、水肿、腺泡细胞坏死且伴有炎性浸润,与Sham组比较,SAP组血清AMY水平显著升高（P＜0.05）,这些结果提示造模成功;（2）通过形态学观察发现,与Sham组相比,SAP组的大鼠腹水量明显增加,同时可见肠系膜皂化斑,回肠组织明显扩张水肿;与SAP组相比,SG组的大鼠在6h、12h和24h时间点腹水量较SAP组减少,肠系膜皂化斑较SAP组明显减轻,回肠组织扩张水肿情况亦显著改善;（3）通过检测各项血清学指标后发现,与Sham组相比,SAP组的大鼠血清AMY、IL-1β、DAO水平均显著增加（P＜0.05）;与SAP组相比,SG组的大鼠在6h、12h和24h时间点的血清AMY、IL-1β、DAO水平均有所下降（P＜0.05）;（4）通过胰腺和回肠组织病理评分发现,与Sham组相比,SAP组的大鼠胰腺和回肠组织病理评分明显增加（P＜0.05）;与SAP组相比,SG组的大鼠在6h、12h和24h时间点较SAP组胰腺组织病理评分降低（P＜0.05）,且回肠组织病理评分也明显降低（P＜0.05）;（5）根据免疫组化结果显示,与Sham组相比,SAP组大鼠回肠组织中NF-κBp65蛋白表达水平明显增加,MFG-E8蛋白表达水平显著降低;与SAP组相比,SG组的大鼠回肠组织中NF-κBp65蛋白表达水平下降,MFG-E8蛋白表达水平升高。结论:红藤可减轻SAP大鼠炎症反应,改善肠黏膜屏障功能,从而发挥对SAP的治疗作用,其作用机制可能与抑制NF-κB通路,增加回肠组织黏膜MFG-E8蛋白表达水平有关。
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