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骨组织工程技术是目前公认的最有希望修复骨缺陷的治疗方法之一。生物反应器是获取大量骨组织种子的重要途径。微球具有较大的比表面积,短时间细胞可以在微球表面大量增殖。并且培养过程中添加微载体就可以完成细胞的传代,避免了传统培养方法中使用胰酶消化对细胞的损害。但是目前商业化的微载体降解能力差,价格昂贵。因此,研制优质微载体生物材料仍是当前研究热点。本研究通过使用致孔剂联合乳化挥发法制备出聚乳酸（Polylactide, PLA）和纳米羟基磷灰石/聚乳酸（Nano-Hydroxyapatiten/ Polylactide, nHAP/PLA）中空多孔微球,考察不同的微球的物化性质,并将成骨细胞（Osteoblasts, OBs）接种在微球上,考察微球的生物相容性,以期制备出最适合成骨细胞生长的微球。以二氯甲烷（CH2C12）为溶剂,明胶为分散剂,NH4HCO3为致孔剂制备中空多孔的PLA微球。微球的粒径大小和粒径分布受聚乳酸浓度、分散剂浓度、复乳搅拌速度和致孔剂浓度等因素影响。采用相同工艺制备了nHAP/PLA微球,通过比较不同nHAP加入量微球的表面形貌、吸水率、接触角和悬浮能力,筛选出最适合细胞培养的nHAP/PLA微球,并通过正交实验优化制备工艺。将培养至第4代SD大鼠的成骨细胞接种到微球上,考察不同nHAP含量的nHAP/PLA微球上细胞的黏附,增殖和蛋白表达的影响。实验结果表明,在一定的范围内,聚乳酸微球粒径随着聚乳酸浓度的增大而增大,分散剂浓度的增大而降低,复乳搅拌速度的增大而减小；微球平均粒径随nHAP含量的增大先减小后增大。正交实验结果表明：当nHAP含量为20%时,复合微球制备的最佳水平组合为PLA浓度为10%、明胶浓度为0.25%、转速为300 rpm和NH4HCO3浓度为10%。nHAP含量为20%时nHAP/PLA中空多孔微球具有最大的蛋白吸附能力,亲水性和细胞黏附能力。培养5天,nHAP含量为20%的nHAP/PLA微球上细胞数量最多与细胞分布状况最为均匀；培养至14天和21天,成骨细胞ALP和总蛋白含量最高。通过以上的实验结果,我们可以得出结论：采用致孔剂联合乳化挥发法制备的nHAP含量为20%时nHAP/PLA微球接触角为70°,具有较高的亲水性,蛋白吸附能力和细胞黏附增殖能力,最适合成骨细胞生长;该nHAP含量下微球的最佳制备工艺为PLA浓度为10%、明胶浓度为0.25%、转速为300 rpm, NH4HCO3浓度为10%。