论文部分内容阅读
目的：观察蒙古沙鼠短暂性前脑缺血再灌注损伤及美满霉素干预后，高尔基体的形态学改变和TGFβ3表达变化，研究TGFβ3细胞内定位，探讨美满霉素的神经保护作用及作用机制。
方法：通过夹闭双侧颈总动脉的方法建立沙鼠脑缺血再灌注模型。50只沙鼠随机分为正常对照组(N)、假手术组(S)、缺血再灌注组(I/R)、美满霉素干预组(MI/R)。美满霉素干预组的沙鼠在实验前1天开始腹腔注射美满霉素(45mg/kg，BID)。缺血再灌注组用同剂量生理盐水替代。缺血再灌注组及美满霉素干预组分别在缺血10min后再灌注，并于再灌注后(IR)6小时(6h)、1天(1d)、3天(3d)、7天(7d)的各时间点分批处死动物，快速取脑组织制作标本。采用HE染色观察海马CA1区存活神经细胞数目；采用免疫组织化学方法检测额叶皮质细胞TGF-β3阳性细胞数目及高尔基体形态学改变；采用免疫荧光共聚焦的方法观察TGF-β3在额叶皮质细胞高尔基体的定位情况；全部数据用SPSS13.0进行统计分析。
结果：
1.蒙古沙鼠经历缺血性打击后，海马CA1区神经细胞发生凋亡，这种改变在缺血再灌注后3天及7天最为明显，发生了“延迟性的神经细胞死亡”。美满霉素干预后，海马CA1区存活神经细胞数增加。
2.脑缺血再灌注后额叶皮质神经细胞TGF-63表达水平升高，美满霉素能够降低相应时间点TGF-63的表达水平。
3.在正常组、假手术组、所有美满霉素的干预组及缺血再灌注6h，1d，3d组中，高尔基体没有发生明显的形态学改变，在缺血再灌注7天组中，部分皮质细胞的高尔基体丧失了正常的网状结构，高尔基体颗粒减少，染色变淡。
4.高尔基体特异性标志物TGN38的免疫荧光与TGF-β3的免疫荧光在蒙古沙鼠皮质细胞内明显重叠。
结论：
1.美满霉素在沙鼠脑缺血再灌注模型中具有神经保护作用，其神经保护作用可能与改变TGF-β3表达水平有关。
2.沙鼠脑缺血再灌注7天后，部分皮质细胞的高尔基体形态发生了改变。
3.在沙鼠皮质细胞内，TGF-β3存在于高尔基体内，表明TGF-β3的分泌依赖高尔基体，同时TGF-β3对高尔基体可能具有保护作用。