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目的:研究软坚清脉颗粒对下肢缺血性小鼠的药效学实验研究,动物实验通过制作下肢缺血性小鼠实验模型研究软坚清脉颗粒对下肢动脉缺血小鼠的血流情况检查以及对VEGF、CD31和PDGF的表达水平研究;细胞实验通过制备大鼠含药血清,通过含药血清作用于缺氧损伤的HUVECs,研究软坚清脉颗粒对血管内皮细胞缺氧损伤的保护作用研究。方法:1、动物实验:C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组和模型组,模型组用手术结扎股动脉建立下肢缺血性小鼠模型,模型成功后随机分为软坚清脉颗粒高、中、低三个剂量组,分别灌胃给予软坚清脉颗0.185 g·kg-1·d-1、0.370 g·kg-1·d-1和0.740 g·kg-1·d-1溶液,每天1次,连续28d给药后用激光散斑血流成像仪检查血流流动情况;通过免疫荧光染色观察小鼠VEGF和CD31的表达水平;ELISA检测血清中VEGF和PDGF含量表达。2、细胞实验:SD大鼠随机分为对照组和软坚清脉颗粒低、中、高剂量组,分别灌胃给予0.9%Na Cl溶液和0.275 g·kg-1·d-1、0.550 g·kg-1·d-1、1.100g·kg-1·d-1软坚清脉颗粒剂溶液,每天2次,连续灌胃10 d。末次给药后采集心脏血液,制备含药血清。将人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）分成空白、模型和软坚清脉颗粒低、中、高剂量组。空白组加不含含药血清的完全培养基,置于常规环境下培养（21%O2）;模型组细胞加入制备的对照组含药血清,软坚清脉颗粒各剂量组细胞分别加入制备的相应组别的含药血清。空白组除外,其他各组置于含95%N2+5%CO2混合气体的培养箱培养,建立缺氧损伤模型。MTT法检测细胞活力;Hochest33342和Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡;Rho123染色后流式细胞仪检测线粒体膜电位（MMP）;PCR和Western blot分别检测细胞中TL1A和Caspase-3的m RNA和蛋白表达水平。结果:1、动物实验:（1）普通饲料喂养并在手术建立下肢缺血性模型后,造模成功后持续给药直至第28d后,观察下肢缺血性小鼠下肢血流情况:与正常组对比,模型组中下肢动脉血流阻断,未见其血流通过,可见造模后下肢动脉缺血;同模型组相比较,软坚清脉颗粒低、中、高剂量组血流分叉分支较多,说明其侧枝循环血供良好;（2）下肢缺血性小鼠VEGF表达:与正常组相比较,模型组内VEGF较正常组内VEGF表达较少（P<0.01）;与模型组相比较,软坚清脉颗粒在低剂量组上优于模型组（P<0.05）,存在剂量上的依存性,且软坚清脉颗粒中、高剂量组别明显高于模型组这一组别（P<0.01）;（3）在血管新生标记物CD31的表达:与正常组相比,模型组血管中CD31较正常组血管中CD31表达减少（P<0.05）;与模型组对比,中药复方软坚清脉颗粒中和高剂量优于模型组别（P<0.05）,低剂量组CD31表达与模型组无明显差异,但软坚清脉颗粒复方中剂量和高剂量组CD31表达明显高于模型组（P<0.01）;（4）血清中VEGF表达:与正常组相比,模型组小鼠血清中VEGF表达比正常组表达含量下降,低于正常组,其差异具有统计学意义（P<0.05）;模型组与软坚清脉颗粒低剂量、中剂量和高剂量中VEGF表达呈递增趋势（P<0.05,P<0.01）;且软坚清脉颗粒中、高剂量明显高于低剂量组（P<0.01）。（5）血清中PDGF表达:软坚清脉颗粒对小鼠血清中PDGF表达,与正常组对比,模型组中PDGF表达低于软坚清脉颗粒正常组（P<0.05）,且中、低、高三个剂量组随剂量上变化呈逐步递增状态,且中、高剂量表达优于低剂量组（P<0.01）。2、细胞实验:（1）缺氧诱导48 h后,模型组HUVECs细胞活力较空白组活力显著降低（P<0.01）;同模型组相比较,软坚清脉颗粒中、高剂量组的细胞活力显著升高（P<0.01）;且中、高剂量组的细胞活力明显高于低剂量组（P<0.01）;（2）缺氧诱导24 h后,模型组细胞核固缩碎裂并出现凋亡小体,细胞凋亡率较空白组明显升高（P<0.01）;软坚清脉颗粒各剂量组的核固缩和凋亡小体明显减少,细胞凋亡率较模型组均显著降低（P<0.05,P<0.01）;且中剂量和高剂量组的细胞凋亡率明显低于低剂量组（P<0.01）;（3）与空白组相比较,模型组细胞MMP显著降低（P<0.01）;与模型组相比较,软坚清脉颗粒各剂量组细胞MMP显著升高（P<0.05,P<0.01）;且中、高剂量组细胞的MMP明显优于低剂量组（P<0.01）;（4）与空白组相比,模型组细胞TL1A和Caspase-3 m RNA和蛋白表达水平显著升高（P<0.01）;与模型组相比,软坚清脉颗粒各剂量组细胞TL1A和Caspase-3m RNA和蛋白表达水平显著降低（P<0.05,P<0.01）;且中、高剂量组细胞TL1A和Caspase-3 m RNA表达量明显低于低剂量组（P<0.01）。结论:中药复方软坚清脉颗粒能够促进下肢缺血性小鼠血流增加,剂量性的促进VEGF和CD31的表达,对VEGF和PDGF表达具有促进作用,促进下肢血管新生并建立侧枝循环;软坚清脉颗粒含药血清可以通过稳定MMP抑制缺氧诱导的HUVECs细胞凋亡,其作用机制的表达可能与抑制TL1A和Caspase-3的表达相关。