宁夏解磷细菌的分离筛选及其田间应用

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半干旱区土壤形成过程微弱,母质砂性强,干旱少雨,使得土壤有效磷含量特别低,仅3 mg·kg-1左右,成为限制作物生长的重要因素之一。石灰性土壤中大量存在的碳酸钙使得磷极易通过专性吸附而被固定,从而失去有效性。采用微生物学手段促进石灰性土壤中较丰富的全磷释放出有效磷,对改善石灰性土壤磷素供应状况,提高作物产量具有重要意义。本论文针对石灰性土壤中磷素的转化,通过自主筛选宁夏土著解磷细菌,开展田间栽培试验,主要取得以下结果:1.采集宁夏玉米、枸杞等作物的根际土壤,通过以磷酸三钙为单一磷源的蒙金娜无机磷培养基进行解磷细菌的分离与筛选。根据水解圈(D/d≥1.95)大小比较筛选到20株解磷细菌,经液体发酵试验,最终获得1株溶解无机磷能力较好的菌株A-8,解磷总量达187.92 mg·L-1,其中环境可溶性磷含量为115.51 mg·L-1。通过形态学观察、生理生化试验和16SrDNA分子鉴定,结果表明菌株A-8为肠杆菌属阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)。2.采用液态培养试验,明确不同培养环境对菌株A-8解磷效果的影响,结果显示,菌株A-8在无机磷培养基中的最佳解磷条件为:蔗糖1%(碳源),硫酸铵0.5%(氮源),碳氮比20:1,初始pH为7.0,环境温度30℃。3.田间试验表明,施入不同浓度解磷细菌能够改善土壤供磷状况,饲料油菜的株高、茎粗、干物质累积较未施菌都有显著增加。当解磷细菌的浓度为1×108CFU·mL-1,明显增加全生育期中土壤有效磷含量,且增幅范围达到13%~38%;同时也显著降低土壤全磷含量,降低幅度较小,可达到4%~6%;对饲料油菜生长状况来看,随着作物生长时间的延长,该浓度解磷菌剂有效增加植株株高、干物质的累积。当解磷细菌的浓度为1×1012CFU·mL-1施入土壤中,对土壤磷素转化效果一般;但是对饲料油菜的生长趋势及养分累积来看,该浓度菌剂明显增加作物茎粗,显著增加作物收获期地上部氮、磷、钾养分累积,分别与CK相比增加65%、72%与69%,对比其它菌浓度处理较明显。4.不同施氮量与解磷菌剂配施对土壤有效磷含量变化差异较大,其中施氮量为120 kg·hm-2处理,较其他施肥处理相比具有显著性差异,与CK相比,在作物全生育期有效磷增幅达到16%~40%,增幅较明显;同时土壤全磷含量就有所降低,且与CK相比,降低幅度达15%~25%。对饲料油菜生长状况来看,随着作物生长时间的延长,饲料油菜的生长、植株氮磷钾吸收和鲜草产量影响不同。施氮量为120 kg·hm-2处理对作物株高有很好地促进作用,且与CK相比,明显增加幅度达到35%~50%;在作物由营养生长期转化生殖生长期时,该处理显著提高作物茎粗、干物质累积量;并且对于作物收获期地上部氮、磷、钾累积量,施氮量为120 kg·hm-2处理分别与CK相比增加71%、73%、65%,与其他施氮量处理存在显著性差异。
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