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禽流感是目前对家禽养殖业造成巨大危害的一种感染性疾病,高致病性禽流感不仅能够造成养殖家禽的大面积死亡,还能够跨越中间传播感染其他哺乳动物。禽流感的监测工作是我国高致病性禽流感综合防控的重要手段之一,在禽流感监测过程中也分离到多株H6亚型禽流感病毒和其他亚型禽流感病毒。本研究对从2010年-2012年分离的92株H6亚型AIV进行表面基因的序列分析,在此基础上挑选18株病毒进行全基因序列分析和进化分析、抗原性分析以及对小鼠的致病性差异实验,来研究H6亚型AIV的生物学特性差异。18株病毒的抗原型分析结果表明,18株病毒可分为4个抗原群,各亚群之间抗原性差异显著。表面基因测序后发现,分离到的H6亚型病毒主要为H6N2亚型和H6N6亚型,其中H6N6亚型AIV的比例随分离年代逐渐增加。全基因组遗传演化分析表明,内部基因主要为稳定遗传的H6家系的分支,较少毒株内部基因来自H9和H5亚型AIV。基因分型结果表明,H6亚型AIV具有8个基因型,并且均为重组基因型,其中以毒株A/Chicken/HuNan/S1103/2010(H6N6)为代表的基因型占半数(10/18)以上,为主要流行的基因型。小鼠致病性实验表明,18株病毒均能感染小鼠,感染后均能在肺脏中分离到病毒,其中15株病毒能够在鼻甲中复制,但其他器官中均分离不到病毒,病毒不致死小鼠,感染后没有引起小鼠造成明显的体重变化。本研究利用浓缩的病毒粒子作为免疫原,免疫5-6周龄的BALB/c小鼠。利用细胞融技术获得融和瘤细胞,采用血凝抑制方法筛选针对H6HA的单克隆抗体,经过有限稀释法克隆培养后获得8株具有血凝抑制活性的单克隆抗体。8株单克隆抗体在特异性实验中证明,均具有良好的免疫原性,能够特异性的结合病毒HA。同时与以分离的92株病毒的血凝抑制结果表明,制备的单克隆抗体能够识别84%的H6亚型AIV,具有良好的亚型鉴定能力,这些单抗的研制成功为H6亚型AIV的抗原快速检测和H6HA蛋白结构和功能的深入研究提供了物质基础和条件。