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轮状病毒(Rotavirus)属于呼肠病毒科(Reoviridae)轮状病毒属(Rotavirus),是一个直径约为70 nm、无包膜、具有三层衣壳的RNA病毒。1973年,RV被发现为引起婴幼儿非细菌性肠胃炎的主要病原体。目前每年全球约有600,000儿童死于RV感染所导致的重症腹泻中。RV基因组包含11个分节段的双链RNA,编码6个结构蛋白和6个非结构蛋白。根据结构蛋白VP6的抗原性差异,可将轮状病毒分为A-G 7个组,其中,A组为引起婴幼儿腹泻的主要病原。A组RV非结构蛋白NSP2一般由317个氨基酸组成,是一个大小约为35 KDa的碱性蛋白质,N末端和C末端由一个带正电的25 A深的裂缝分开,里面含有能结合和水解NTPs的残基。NSP2参与RV复制,它能与RV其它蛋白,如NSP5相互作用形成毒质体。在毒质体内,病毒基因组双链RNA被复制并包装进入前病毒核心颗粒中。重组表达的NSP2也具有Mg2+依赖性NTPase活性,能够水解NTPs上的γ磷酸基团,起到NTP酶的作用。为了深入了解NSP2的重组表达、亚细胞分布及其免疫学性质,本研究克隆了A组人RV TB-Chen株NSP2全基因,构建了重组表达质粒pET-NSP2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了重组蛋白NSP2(rNSP2)。研究结果表明,rNSP2表达量占菌体总蛋白量的44.54%。利用纯化的rNSP2免疫豚鼠,能够诱发豚鼠产生抗NSP2特异性血清抗体。Western blot和免疫荧光检测表明所得抗体不仅能与该rNSP2蛋白发生特异性反应,而且可以与SA11株或Wa株RV感染的MA104细胞中表达的病毒NSP2发生反应。研究结果还表明,在菌体细胞中表达的rNSP2以包涵体形式存在,充满了整个菌体;SA11株或Wa株RV感染的MA104细胞中表达的病毒NSP2在病毒感染3h时就能检测到,并且主要以毒质体形式存在于细胞质内,在细胞核周围有密集分布。以上研究结果为进一步研究该NSP2蛋白的结构、功能、免疫学性质及其开发应用奠定了很好的基础。