基于SERS方法检测的DNA酶生物传感器的研究

来源 :湖南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lvsby2007
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表面增强拉曼散射(SERS)是基于拉曼散射的一种分析表征技术。由于其灵敏度高、分辨率高、水干扰小、稳定性好等优点,在材料、表面科学、分析化学、生物学、诊断学等方面都得到了广泛应用。压电传感器是高灵敏的一种生物传感器,具有简便、快速、灵敏、成本低、响应谱广、可实时数据输出等优点,在生物技术、临床诊断、环境监测、食品工业、医药和军事等领域具有广泛的应用前景。本文重点关注如何提高传感器的检测灵敏度等问题,利用纳米材料优越的信号放大性能发展了几种新型的生物传感器,通过SERS技术对Pb2+,腺苷进行了定量检测,同时发展了基于压电技术的PDGF-BB生物传感器。具体包括:在第二章中,发展了一种基于多层金属-分子-金属纳米结的超灵敏的Pb2+ SERS检测方法。本章选用巯基标记的GR-5 DNA酶组装在金电极表面,作为Pb2+的特异性识别探针部分。Pb2+存在时,能够催化嵌入在该DNA酶底物链中RNA碱基的水解,使其被剪切为两部分。金电极表面剩余的核酸片段部分可以和纳米金标记的报告探针链杂交,通过层层自组装,利用完全互补的两条DNA链间的杂交作用力,纳米金之间形成了纳米结,标记在报告探针上的拉曼标记分子与AuNPs间的距离缩短,拉曼信号得到显著增强。该传感器对Pb2+的检测限可达到1.0×10-10 M。在第二章发展的方法的基础上,第三章进一步发展了基于目标导致链置换型核酸适体SERS传感器。核酸适体首先与金电极表面的捕获探针互补杂交被固定在电极表面,当腺苷存在时,与核酸适体发生特异性结合,导致其构型发生变化,从电极表面脱落。然后,捕获探针可以和纳米金标记的报告探针链杂交,同样通过层层自组装形成纳米结,从而导致拉曼信号的显著增强。该传感器具有较好的选择性和较高的灵敏度,检测下限为5.0×10-8 M。在最后一章中,我们提出了一种简便的基于抗体和核酸适体的夹心型压电免疫传感器,用于PDGF-BB的检测。首先在石英晶振表面通过偶联组装上抗PDGF-BB抗体,然后待测物PDGF-BB被晶振表面的抗体特异性结合,最后结合纳米金标记的PDGF-BB核酸适体,从而引起晶振表面显著的质量变化,导致明显的频率响应。该传感器对PDGF-BB的浓度检测范围为0.05~5μg/mL,检测限为1.0×10-(3)μg/mL。
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