论文部分内容阅读
本试验旨在探讨烟酸对生长中期草鱼的生长性能、消化吸收能力、肠道抗氧化及肠道免疫能力及相关信号分子的影响，并确定生长中期草鱼烟酸需要量。本试验选择体重为255.63±0.41 g健康生长中期草鱼540尾，平均分为6个处理组，每个处理组含3个重复(n=30)。各处理组之间初始体重差异不显著(P＞0.05)，分别投喂含烟酸为3.95、14.92、24.98、35.03、44.97和55.01 mg/kg的饲粮，试验为期8周。 试验结果表明:饲粮中适宜水平的烟酸显著提高了生长中期草鱼末重(FBW)、采食量(FI)、增重百分比(PWG)和饲料效率(FE)（P＜0.05）;同时，显著提高了生长中期草鱼肝体指数(HSI)、肝胰蛋白含量(HPC)、肠道蛋白含量(IPC)、肠体指数(ISI)和肠长指数(RGL)、肝胰脏和肠道的糜蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶和胰蛋白酶活力以及前肠、中肠、后肠γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、Na+/K+-ATPase、肌酸激酶(CK)和碱性磷酸酶(AKP)的活力（P＜0.05），此外，适宜烟酸提高了前肠CCK浓度和血清生长激素(GH)含量（P＜0.05）。进一步研究发现:适宜烟酸显著提高生长中期草鱼肝胰脏trypsinogen1、trypsinogen2、chymotrypsinogen、amylasemRNA水平，肠道Na+/K+-ATPase1α1 a1(atp1a1a.1)、Na+/K+-ATPase1α1 a4(atp1a1a.4)和CK mRNA水平。同时，烟酸上调肠道TOR和S6K1 mRNA表达水平但下调4EBPmRNA表达水平(P＜0.05)。此外本试验结果显示:适宜烟酸能显著降低生长中期草鱼肠道丙二醛(MDA)和蛋白质羰基(PC)含量，提高肠道抗羟自由基能力(AHR)、抗超氧阴离子的能力(ASA)、Cu/Zn超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)活力以及还原性谷胱甘肽含量(GSH)（P＜0.05）。进一步研究发现:烟酸显著上调草鱼肠道Cu/ZnSOD、MnSOD、GPx、CAT、GST和GR mRNA表达量，同时上调核转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）mRNA表达量并下调绑定蛋白Keap1a mRNA表达水平(P＜0.05)，但烟酸对Keap1b mRNA表达量无显著影响（P＞0.05）。此外，烟酸显著提高草鱼前、中、后肠溶菌酶(LA)和酸性磷酸酶(ACP)的活力以及补体C3含量（P＜0.05），显著上调肠道白介素10（IL-10）、转化生长因子β1(TGF-β1)、抗菌肽（LEAP-2，hepcidin）以及信号分子IBα mRNA表达水平，下调肠道肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ2(IFNγ2)、白介素1β（IL-1β）、白介素8（IL-8）以及信号分子核因子-κB p65(NF-κB p65)、IκB激酶α(IKKα)、IκB激酶β(IKKβ)、IκB激酶γ（IKKγ）mRNA表达水平(P＜0.05)。烟酸显著上调肠道claudin b、claudin3、claudin15、claudin c、ZO-1和occludin的基因表达量(P＜0.05)，下调肠道claudin12和信号分子MLCK、p38MAPK的基因表达量(P＜0.05)。综上所述，适宜量的烟酸可能通过TOR信号（TOR、S6K1和4EBP信号分子）上调消化吸收酶基因表达，提高消化吸收酶活力增加其消化吸收能力;适宜量的烟酸可能通过调控Nrf2/Keap1a信号途径上调抗氧化酶基因表达，提高抗氧化酶活性改善中期草鱼肠道抗氧化状态;适宜量的烟酸通过IKK/NF-κB p65/IκB信号途径上调抗炎细胞因子、下调促炎细胞因子降低炎症反应改善肠道免疫状态;并通过p38/MLCK信号分子，调节紧密连接蛋白表达，维持肠道结构完整性提高中期草鱼肠道的屏障功能;本试验以PWG、胰蛋白酶活、肠道Na+/K+-ATP酶活及溶菌酶活力为标识，确定出中期草鱼（255.63±0.41 g）饲粮烟酸需要量分别为34.01、35.10、42.08和39.80 mg/kg饲粮。