【摘 要】
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目的:研究TRIM21在子宫内膜异位症在位内膜中的表达及意义,为子宫内膜异位症临床诊疗提供理论依据。方法:1、收集临床标本及患者信息,分为两组,子宫内膜异位症患者为EMs组,卵巢畸胎瘤患者为对照组。2、体外提取两组患者的子宫内膜间质细胞,培养并行细胞鉴定。3、提取EMs组的子宫内膜间质细胞行CO-IP实验,并利用质谱分析找出与CacyBP/SIP相互作用的蛋白。4、免疫组织化学方法检测EMs组和对
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目的:研究TRIM21在子宫内膜异位症在位内膜中的表达及意义,为子宫内膜异位症临床诊疗提供理论依据。方法:1、收集临床标本及患者信息,分为两组,子宫内膜异位症患者为EMs组,卵巢畸胎瘤患者为对照组。2、体外提取两组患者的子宫内膜间质细胞,培养并行细胞鉴定。3、提取EMs组的子宫内膜间质细胞行CO-IP实验,并利用质谱分析找出与CacyBP/SIP相互作用的蛋白。4、免疫组织化学方法检测EMs组和对照组的子宫内膜组织中TRIM21的表达水平;Western blot检测EMs组和对照组在位子宫内膜间质细胞中TRIM21的蛋白表达水平。5、CO-IP检测EMs组和对照组在位子宫内膜间质细胞中TRIM21与CacyBP/SIP,TRIM21 与β-catenin 之间相互作用。6、敲低子宫内膜异位症在位内膜间质细胞中TRIM21,Western blot检测CacyBP/SIP,β-catenin,TRIM21 表达水平。7、在 293T 细胞中共同转染 Flag-β-catenin,HA-TRIM21 质粒,Western blot检测HA-TRIM21质粒浓度梯度升高时,Flag-β-catenin的表达情况。结果:1、两组在年龄、BMI和SOD方面无显著性差异（P＞0.05）。2、EMs组及对照组所提取细胞经鉴定为子宫内膜间质细胞。3、质谱分析结果找到了 TRIM21蛋白,CO-IP实验双向验证了 TRIM21和CacyBP/SIP可以相互作用。4、免疫组化结果显示,在EMs组和对照组在位内膜组织中TRIM21的表达无差异（P＞0.05）;Western Blot检测结果显示,TRIM21在EMs组和对照组在位子宫内膜间质细胞的表达也无差异（P＞0.05）。5、在EMs组在位内膜间质细胞中,CO-IP实验发现TRIM21可与CacyBP/SIP、β-catenin 相互作用,而在对照组中 TRIM21 与 CacyBP/SIP,β-catenin无相互作用。6、敲低EMs组子宫内膜间质细胞中TRIM21,β-catenin的表达量增加,而CacyBP/SIP的表达量无明显变化。7、在293T细胞中共同转染Flag-β-catenin,HA-TRIM21质粒,随着HA-TRIM21质粒浓度升高,Flag-β-catenin呈下降趋势。结论:在子宫内膜异位症在位内膜中,虽然TRIM21无异常表达,但其与CacyBP/SIP相互作用,可能通过调节β-catenin信号分子的表达量,从而调控Wnt/β-catenin通路,参与子宫内膜异位症的发生发展。
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