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一、桦木酸对前列腺癌骨转移的影响目的评估桦木酸(BetA)对前列腺癌(PCa)PC-3细胞有氧糖酵解相关的增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化(EMT)的影响及机制。探究桦木酸对前列腺癌的治疗作用及意义。方法培养人前列腺癌细胞(PC-3细胞),使用桦木酸处理PC-3细胞,通过对比实验组与对照组之间的细胞存活率测定、细胞增殖情况、糖酵解代谢情况、细胞迁移及侵袭试验、细胞球体形成及集落形成试验来了解桦木酸对前列腺癌PC-3细胞的影响。使用实时PCR获取并测定糖酵解中的几种主要限速酶(如己糖激酶2(HK2)和磷酸果糖激酶1(PFK1))的mRNA水平,并运用Western blot技术分析对比实验组与对照组的这几种目标蛋白的水平。并用同样的方法测定EMT过程中N-钙粘附素、纤维连接蛋白、波形蛋白和ZEB1等目标蛋白的表达水平。结果桦木酸可抑制前列腺癌PC-3细胞的存活和增殖,并降低细胞周期蛋白A和细胞周期蛋白依赖性激酶的表达。桦木酸还可降低PC-3细胞对葡萄糖的摄取和消耗、细胞内乳酸水平和细胞外酸化速率,降低糖酵解限速酶己糖激酶2(HK2)和磷酸果糖激酶1(PFK1)的表达和活性,其中还涉及到缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和转录共激活因子相关蛋白(YAP)。此外,桦木酸通过抑制PCa细胞在体外的迁移、侵袭、球体形成和集落形成,有效地抑制了肿瘤的转移。桦木酸抑制PC-3细胞的EMT过程,这从EMT相关标志物的表达变化中得到了证实。低剂量BetA对PCa细胞EMT的抑制作用呈剂量依赖性。结论桦木酸(BetA)可以抑制有氧糖酵解相关的PCa细胞增殖、转移和上皮-间充质转化(EMT),使用桦木酸治疗,可能为一种潜在的有效治疗方案。这证明了桦木酸可作为前列腺癌患者的一种实用的化学预防方法的潜力是合理的。二、白鲜碱对前列腺癌骨转移的影响目的评估白鲜碱(Dictamnine,Dic)对前列腺癌PC-3细胞增殖、转移和上皮-间充质转化的影响及机制。探究白鲜碱对前列腺癌的治疗作用及意义。方法培养人前列腺癌细胞(PC-3细胞),使用白鲜碱处理PC-3细胞,通过对比实验组与对照组之间的细胞增殖情况、细胞迁移及侵袭试验、细胞形态变化来了解白鲜碱对前列腺癌PC-3细胞的影响。分别运用PCR技术检测上皮-间充质(EMT)转化过程和Wnt/β-catenin信号通路中相关标记物的转录mRNA水平变化。运用Western blot技术测定EMT过程中的目标蛋白及Wnt/β-catenin信号通路蛋白水平变化。(如Snail、E-cadherin、β-catenin等)。使用Wnt通道信号激活剂Li Cl处理PC-3细胞后,加入白鲜碱处理PC-3细胞,使用PCR及WB技术检测此过程中的mRNA及蛋白表达水平变化。结果白鲜碱作用后的PC-3细胞在增殖、迁移、侵袭等方面的能力均下降。白鲜碱作用后的PC-3细胞E-cadherin的mRNA及蛋白表达升高,vimentin和Snail及细胞核中β-catenin的mRNA及蛋白的表达降低(P<0.01)。此外,与白鲜碱组比较,白鲜碱与Li Cl联合作用PC-3细胞后Snail的mRNA及蛋白表达升高,E-cadherin mRNA及蛋白表达降低(P<0.01)。结论白鲜碱可抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭,并且可抑制PC-3细胞的上皮-间充质转化。其中的机制可能为白鲜碱通过抑制Wnt/β-catenin/Snail信号通路从而抑制PC-3细胞上皮-间充质转化。