以西北农林科技大学林学院苗圃栽植的四年生叉子圆柏的新生茎段为外殖体建立无菌系,以MS、WPM和B5为基本培养基,对叉子圆柏的离体快繁技术及培养中的多种影响因子进行了较系统的研究,取得的主要结果如下:(一)无菌系的建立木质化茎段污染率高,不适宜作为建立无菌系的外植体,本试验采用叉子圆柏当年生茎段做外植体建立了无菌系,消毒方法研究表明,适宜的消毒方法是75%酒精浸泡30 s,0.1%升汞12 min。(二)茎段诱导增殖培养以MS培养基为基本培养基,添加细胞分裂素6-BA和生长素NAA,研究不同盐浓度和不同生长调节物质浓度对芽诱导增殖的影响。适宜叉子圆柏茎段分化的诱导培养基为1/2MS+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.3mg/L;适宜叉子圆柏茎段伸长生长的培养基为1/2MS+NAA 3mg/L。在诱导培养基上诱导不定芽,不定芽产生后转接到伸长生长培养基上培养,使增殖效果和伸长效果都达到了最好。该培养基同样适用于继代培养,增殖系数为4.0。(三)试管苗生根诱导通过调整培养基类型或生长调节物质避免了产生愈伤组织,生根培养基中添加了少量活性炭可模拟生根的黑暗环境,吸收足够多的能量,以促进生根。试验表明适宜生根培养基为1/2WPM+6-BA 0.5mg/L +NAA 1mg/L +0.2%活性炭,生根率43%。(四)生根苗移栽移栽基质质地粘重,肥力较强都不利于试管苗的幼嫩根系初期生长,因此选择质地疏松,透气良好的栽培基质是提高移栽成活率的关键。适宜移栽基质为蛭石+珍珠岩+沙(1:1:1),成活率可高达93%。