【摘 要】
:
阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种起病隐匿的神经退行性疾病,表现为神经元渐进性异常衰老和死亡。AD的主要病理特征为神经细胞内微管相关蛋白tau过度磷酸化形成神经纤维缠结和细胞外Aβ沉积为淀粉样斑块。尽管AD发生机制尚有许多未解之谜,但Aβ聚集提高AD风险仍是目前主流假说之一。有鉴于PSEN1是Aβ级联生成的限速酶——γ-分泌酶的催化亚基,通过调控PSEN1降低Aβ生成有
【基金项目】
:
国家自然科学基金(31860301,31900410);
论文部分内容阅读
阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种起病隐匿的神经退行性疾病,表现为神经元渐进性异常衰老和死亡。AD的主要病理特征为神经细胞内微管相关蛋白tau过度磷酸化形成神经纤维缠结和细胞外Aβ沉积为淀粉样斑块。尽管AD发生机制尚有许多未解之谜,但Aβ聚集提高AD风险仍是目前主流假说之一。有鉴于PSEN1是Aβ级联生成的限速酶——γ-分泌酶的催化亚基,通过调控PSEN1降低Aβ生成有望作为AD的治疗靶点。miRNAs是一类19-24nt的非编码RNA,通过碱基互补可靶向一个或多个基因从而影响转录或翻译。挖掘AD发生发展过程中调控性的miRNAs及其对AD相关基因的靶向效应,可为AD风险防范及发生发展提供一条新的思路。本研究首先通过Target Scan、miRDB、miRwalk等网站预测到5个可能靶向PSEN1的候选miRNAs。将PSEN1 3’UTR序列克隆至双荧光素报告载体中后与候选miRNA模拟物(mimics)共转染HEK 293细胞,双荧光素酶报告分析实验验证目的miRNA对PSEN1的靶向性。结果提示,候选miRNAs中,仅miR-3940-5p组双荧光素酶活性较对照显著下降(P<0.01),提示其对PSEN1的靶向性。随后将PSEN1 3’UTR中的miR-3940-5p种子序列进行突变后再构建到报告载体中,双荧光素酶活性无显著变化,提示突变后的PSEN1与miR-3940-5p的靶向效应丧失,反向证实了miR-3940-5p对PSEN1的靶向性。为探究miR-3940-5p在靶向PSEN1基础上对基因表达的调控效应,研究将miR-3940-5p mimics或抑制剂(inhibitor)瞬时转染SH-SY5Y细胞。分别以RT-q PCR、Western Blot检测受试细胞PSEN1 mRNA与翻译水平变化。结果显示miR-3940-5p mimics显著调低PSEN1 mRNA水平(P<0.01)和翻译(P<0.001),而miR-3940-5p inhibitor则显著上调PSEN1 mRNA水平(P<0.05),翻译上调但未达显著水平。为了进一步确证miR-3940-5p对PSEN1表达的靶向调控,运用慢病毒包装构建了稳定过表达miR-3940-5p的SH-SY5Y细胞系,发现该细胞系PSEN1 mRNA和翻译水平均显著低于对照(P<0.001)。最后,为探究miR-3940-5p是否影响Aβ的产生,研究向过表达了人瑞典突变型APP的细胞SH-SY5Y APPswe瞬时转染miR-3940-5p mimic。ELISA分析发现,miR-3940-5p mimic显著降低受试细胞Aβ42(P<0.01)、Aβ40(P<0.01)含量。进一步通过慢病毒包装构建稳定过表达miR-3940-5p的SH-SY5Y APPswe细胞,ELISA结果显示,稳定过表达miR-3940-5p能显著降低细胞内Aβ42(P<0.001)、Aβ40(P<0.001)生成量。为验证miR-3940-5p-PSEN1-Aβ轴的存在,研究用RNA干扰的方法敲低SH-SY5Y APPswe细胞中PSEN1表达(si-PSEN1),结果显示si-PSEN1组Aβ42、Aβ40水平均显著低于对照(P<0.01、P<0.001)。提示miR-3940-5p通过下调PSEN1参与Aβ生成。综上,该研究发现并证实miR-3940-5p可以从转录和翻译层面靶向抑制PSEN1的表达,从而间接参与了Aβ42和Aβ40的生成的调控。本研究为借助特异性miRNA对AD病理靶标的动态调控、干预AD发生风险提供了借鉴。
其他文献
荛花属(Wikstroemia)隶属瑞香科,其属下分为毛花组Sect.Diplomorpha Meisn.和荛花组Sect.Wikstroemia,大约70种,在大洋洲、亚洲东南部和太平洋岛屿都有分布;我国约有51种,45种为中国特有种,几乎分布在全国各地,主要分布在长江流域以南,西南分布最多。荛花属内部分物种具有极高的经济价值和药用价值。目前关于荛花属的研究主要集中在化学成分、药理性质和孢粉学,
钟花报春(Primula sikkimensis)是报春花属钟花报春组多年生草本植物,集中分布在东喜马拉雅地区,在中国主要分布在四川西部、云南西北部和西藏东南部。钟花报春是典型的二型花柱植物,具有自交不亲和繁育系统,是研究二型花柱的形成和演化机制的理想物种。本研究以钟花报春6个居群6个长柱花和6个短柱花共12个个体作为研究材料,通过Illumina平台(Illumina Nova Seq6000)
近几年来,国家大力发展农林业产业,出台了各种利农助农的利好政策,农林业相关企业也逐渐在社会整体经济环境中成为主要角色,保障农林业企业平稳且高效地发展是一个重要的目标,为了实现这一目标,合理地规避财务风险是必要的。本文构建了一个基于改进自编码器的财务风险预警模型,选取了167家农林相关行业企业近七年的财务数据;使用相似度计算法筛选指标,建立由52项指标组成的指标体系;使用熵值法、CRITIC法、独立
个性化推荐已成为帮助用户处理大量信息的重要技术,为了改善用户体验,推荐模型必须准确预测用户对商品的个人偏好。在电商平台,通常商品的每个评分都与一段评论文本相关联,此类评论文本包含丰富的语义信息,将其应用到推荐模型构建中,可以提高评分预测推荐的准确性。目前基于评论文本的评分预测推荐方法仍然存在一些问题:由于不同的评论所包含的信息不同,因此,并不是所有评论都具有同样重要的信息,需要对重要性评论的评价方
氯胺酮(ketamine,KET)属于新精神活性物质,是常见的成瘾药物,因其镇痛及抗抑郁效果在临床应用。但氯胺酮具有成瘾性和神经毒性作用,滥用会损伤神经,且极易复吸。氯胺酮成瘾涉及的脑区众多,成瘾机制尚未完全明确。本文的目的是采用行为学、化学遗传操纵、组织化学和生化分析等研究方法,以条件位置偏爱(conditioned place preference,CPP)为模型,探讨前额叶(prefront
随着农产品电子商务热潮的到来,网购成为用户购买农产品的主要购物方式之一。在线评论作为用户消费的反馈内容之一,能够反映用户的真实使用感知、购买体验,挖掘提取这些评论中的隐藏信息,无论对学者还是商家均有着重大意义。细粒度情感作为评论文本中的隐藏信息,反映出用户真实感受和对产品主题的喜好程度,也涵盖了舆情方向和热点话题信息。该应用领域在辅助用户优化消费决策、建立评价体系、控制网络舆论等方向具有重大研究价
能源植物小桐子的研究开发是国家和云南省的能源战略需求。作为一种热带亚热带起源的典型冷敏植物,低温是限制小桐子产量、分布和产业发展的重要环境因素。我们的前期研究显示低温锻炼可提高小桐子对后续冷胁迫的耐受性,并在生理生化和转录响应层面对其分子机制进行了探究,但有关可变剪接(alternative splicing,AS)介导的转录后调控在此过程中的贡献如何目前仍未清楚。本研究基于前期建立的12℃低温锻
受人类活动的影响,两栖动物种群数量出现了全球范围内的急剧下降。栖息地变化导致的动物种群局部灭绝已成为生物多样性降低的主要原因之一。滇蛙(Nidirana pleuraden)是云南高原常见的无尾两栖动物,分布广泛,适应性强。调查发现,在云南省陆良县小百户镇和三岔河镇分布的两个滇蛙种群,生活于人类活动强度不同的栖息地环境,其中三岔河镇栖息地中的其他两栖动物出现了局部灭绝,仅存滇蛙一种蛙类。为研究滇蛙
复殖吸虫亚纲Digenea是脊椎动物优势的内寄生虫之一,全球已记载25超科、148科、2700余属,18000余种。复殖吸虫亚纲一些科、属阶元间的分类地位、系统发育关系以及物种间的系统发育地位未得到一致的观点,其中常见且世界性分布的斜睾总科和同盘总科,科、属的分类地位分歧较大。本研究综合采用形态鉴定、分子系统发育和比较基因组的研究方法,基于cox1、18S r DNA部分序列以及线粒体基因组的结构
股票市场作为金融市场的重要组成部分,如何稳定该市场并为投资人和管理者提供一个相对客观的股价预测方法,为双方决策提供更为科学合理的依据是研究的重点。而农业又是作为最基本的行业,对我国经济的发展起到至关重要的作用。本论文构建了基于改进CNN的股票K线图的特征提取与股价预测模型来研究股票K线图的涨跌趋势,首先利用爬虫技术爬取了农业企业自上市以来的股票K线图作为原始数据集、对原始数据进行预处理并将K线图转