【摘 要】
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目的观察针刺与悬灸两种不同干预方式治疗胃溃疡对胃组织ASIC3、TRPV1及炎症因子的影响,阐明针灸两种不同干预方式治疗胃溃疡可能的启动途径。方法选用28只雄性SD大鼠（体重240±20 g）,按体重编号,随机选取7只大鼠作为空白对照组（以下简称空白组）。另外21只造模前禁食不禁水24 h,按1ml/200g含量进行无水乙醇灌胃,将造模成功大鼠,随机分为模型对照组（以下简称模型组）、针刺治疗组（以
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目的观察针刺与悬灸两种不同干预方式治疗胃溃疡对胃组织ASIC3、TRPV1及炎症因子的影响,阐明针灸两种不同干预方式治疗胃溃疡可能的启动途径。方法选用28只雄性SD大鼠（体重240±20 g）,按体重编号,随机选取7只大鼠作为空白对照组（以下简称空白组）。另外21只造模前禁食不禁水24 h,按1ml/200g含量进行无水乙醇灌胃,将造模成功大鼠,随机分为模型对照组（以下简称模型组）、针刺治疗组（以下简称针刺组）,悬灸治疗组（以下简称艾灸组）,每组各7只。针刺组:将大鼠装进自制固定器中,暴露相关腧穴,确保大鼠保持相对固定位置及平静状态,选取大鼠双侧“足三里”,采用针具为直径0.28 mm,长15 mm不锈钢毫针进行针刺,直刺5mm,得气后留针20 min,中间行针2次,每天干预1次,连续干预3天。艾灸组:将大鼠装进自制固定器中,暴露相关腧穴,确保大鼠保持相对固定位置及平静状态,选取大鼠双侧“足三里”,采用14mm碳化无烟艾条进行悬灸,采用温和灸,以大鼠皮肤轻微潮红为度,每次干预20 min,每天干预1次,连续干预3天。空白组和模型组:不予干预,仅予抓取及自制固定器固定。干预结束后对所有大鼠进行Guth评分法计算胃溃疡指数;HE染色法观察胃组织形态学变化;免疫印迹检测胃组织中ASIC3和TRPV1蛋白含量;酶联免疫吸附法检测血清中IL-4、IL-6、TNF-α的表达水平。结果1.胃溃疡指数评分结果空白组、模型组、针刺组、艾灸组胃溃疡指数分别为（-）（40.43±3.10）（17.14.±2.19）（20.43±2.76）,溃疡抑制率分别为（-）（0.00%）（57.60%）（49.47%）,与模型组比较,针刺组、艾灸组的胃溃疡指数显著降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。2.胃组织HE染色结果空白组胃黏膜层结构完整,固有腺体排列整齐,形状和大小基本一致,未见充血、肿胀、形态异常或炎性细胞浸润;模型组胃黏膜层破坏严重,腺体整体排列紊乱,其数量显著减少,形状和大小呈不规则,部分黏膜层可见红细胞与水肿,形态异常改变较多,细胞间隙存在明显炎性细胞浸润;针刺组胃黏膜层结构相对完整,腺体局部排列紊乱,形状和大小较规则,部分黏膜层可见少量红细胞及中度水肿,伴有少数炎性细胞浸润,形态异常改变较少;艾灸组胃黏膜层结果相对完整,腺体局部排列紊乱,形状和大小较规则,部分黏膜层可见红细胞及轻度水肿,伴有少数炎性细胞浸润,形态异常改变较少。3.WB检测胃组织ASIC3和TRPV1定位与表达结果与空白组比较,模型组ASIC3表达水平及蛋白灰度值显著升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）,TRPV1表达水平及蛋白灰度值显著降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;与模型组比较,针刺组胃组织中ASIC3表达水平及蛋白灰度值显著降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,TRPV1表达水平及蛋白灰度值升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;艾灸组胃组织中TRPV1表达水平及蛋白灰度值显著升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）,ASIC3表达水平及蛋白灰度值降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）;两治疗组组间比较,针刺组胃组织中ASIC3表达水平及蛋白灰度值较艾灸组降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）,艾灸组胃组织中TRPV1表达水平及蛋白灰度值较针刺组升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）。4.ELISA检测血清炎症因子结果与空白组比较,模型组血清中IL-4表达水平显著降低（P＜0.05）;与模型组比较,针刺组和艾灸组经干预后IL-4表达水平均显著升高（P＜0.05,P＜0.05）;两治疗组组间比较,针刺组血清IL-4表达水平与艾灸组无显著差异性（P＞0.05）。与空白组比较,模型组血清中IL-6、TNF-α表达水平均均显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,针刺组和艾灸组经干预后IL-6、TNF-α表达水平均显著降低（P＜0.05,P＜0.05）;两治疗组组间比较,针刺组血清IL-6、TNF-α表达水平与艾灸组无显著差异性（P＞0.05）。结论1.针刺、悬灸均对胃溃疡模型大鼠具有胃黏膜修复和保护作用。2.针刺、悬灸对胃溃疡模型大鼠胃组织机械感受器ASIC3和温度感受器TRPV1的影响存在明显差异,针刺对ASIC3影响大于艾灸,而艾灸对TRPV1影响大于针刺,二者启动途径有所不同。3.针刺、悬灸均能上调胃溃疡模型大鼠血清中抗炎因子IL-4表达水平,并下调血清中促炎因子IL-6、TNF-α表达水平,改善胃溃疡模型大鼠的胃部炎症环境。
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