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肿节石斛(Dendrobium pendulum)、尖刀唇石斛(D. heterocarpum)和报春石斛(D. primulinum)是观赏性很高的兰科花卉,也是国家二级保护植物。3种石斛均是观赏石斛杂交的重要亲本,离体再生是石斛研究的基础工作,关于3种石斛完整的再生体系研究未见报道。本研究采用组织培养技术从原球茎途径、愈伤组织途径和不定芽途径对3种石斛的再生培养体系各阶段进行了研究,结果如下：1.通过比较外植体、KT和NAA浓度、外源添加物和光照对3种石斛原球茎诱导的影响,得出以芽作为外植体,在40d的暗培养后转入正常光周期培养的条件下适合原球茎的诱导。适合肿节石斛原球茎诱导的培养基为MS+2.0mg/L KT+0.5mg/L NAA+100g/L土豆泥,诱导率能达到40%以上；适合尖刀唇石斛和报春石斛原球茎诱导培养基为MS+1.5mg/L KT+0.5mg/L NAA+100g/L土豆泥,诱导率分别能达到46.67%和51.11%以上。通过比较不同琼脂含量、培养方式、TDZ和NAA浓度以及外源添加物对原球茎增殖与分化的影响,得出液体培养基振荡培养时原球茎的增殖系数较高。适合肿节石斛的原球茎增殖培养基为：1/2MS+0.05mg/L TDZ+0.1mg/L NAA+100g/L土豆泥,原球茎增殖系数为3.23；适宜尖刀唇石斛原球茎增殖的培养基为：1/2MS+0.1mg/L TDZ+0.1mg/L NAA+100g/L土豆泥,原球茎增殖系数为2.96；适宜报春石斛原球茎增殖的培养基为：1/2MS+0.05mg/L TDZ+0.2mg/L NAA+100g/L土豆泥,原球茎增殖系数为3.76。筛选出适宜3种石斛原球茎分化的培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+100ml/L香蕉泥,肿节石斛、尖刀唇石斛和报春石斛的原球茎分化率分别达到91.67%、86.67%和85.00%。2.以茎段作为外植体,通过比较6-BA, NAA,椰乳和蔗糖浓度对3种石斛愈伤组织诱导的影响,得出在20d暗培养后转入正常光周期培养的条件有利于愈伤组织的诱导。适合肿节石斛和尖刀唇石斛愈伤组织诱导的培养基为：MS+2mg/L6-BA+lmg/L NAA,愈伤组织诱导率分别为80.00%和66.67%；适合报春石斛愈伤组织诱导的培养基为：MS+lmg/L6-BA+1.5mg/L NAA,愈伤组织诱导率达到88.33%。通过研究6-BA和NAA浓度对愈伤组织分化的影响可以得出适合肿节石斛愈伤组织分化的培养基为：MS+2mg/L6-BA+0.25mg/L NAA,愈伤组织分化率达到90.00%；适合尖刀唇石斛和报春石斛愈伤组织分化的培养基分别为MS+1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA和MS+lmg/L6-BA+0.25mg/LNAA,愈伤组织分化率分别达到80.00%和92.50%。3.以带有茎节的茎段作为外植体,通过比较6-BA、NAA、椰乳和土豆泥浓度对3种石斛不定芽诱导的影响,得出适合肿节石斛和报春石斛不定芽诱导的培养基为1/2MS+0.5mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+100ml/L椰乳,不定芽诱导率分别为93.75%和90.00%,不定芽增殖系数分别为4.23和3.35；适合尖刀唇石斛不定芽诱导的培养基为1/2MS+0.25mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+100ml/L椰乳,不定芽诱导率为95.00%,增殖系数为3.28。4.通过比较NAA浓度和外源添加物对3种石斛幼苗生根的影响,筛选出适合肿节石斛和尖刀唇石斛生根的培养基为MS+0.5mg/L NAA+100g/L香蕉泥；适合报春石斛生根的培养基为MS+0.75mg/L NAA+100g/L土豆泥,生根诱导率均高达100%。对生根的幼苗进行移栽,珍珠岩和水苔适宜作为3种石斛移栽的培养基质,在条件适宜的情况下,3种石斛组培苗的移栽成活率均能达到85%以上。以上结果建立了3种石斛的高效稳定的组织培养再生体系,为3种石斛的离体繁殖和工厂化生产提供了科学依据。