目的：探索肌红蛋白降解及肌原纤维小片化指数与人体死亡时间的相关性，摸索其中的规律及其用于实践的可行性，为法医学推断死亡时间提供新方法。 方法： 利用免疫组织化学方法、蛋白免疫印迹法(Western BloWing)观测人体骨骼肌中肌红蛋白(Myoglobin，Mb)的降解与死亡时间的相关性；利用肌原纤维小片化指数(Myofibill Fragmentation Index，MFI)，观测蛋白质降解同死亡时间的相关性。 遵循知情同意原则，取6例人体骨骼肌组织，置于室温25±1℃；分别在死后0h、4h、8h、12h、24h、36h、48h、60h、72h取上述肌组织各0.5g。 实验一：运用免疫组织化学的方法，观测人体死后，骨骼肌中肌红蛋白降解情况。将上述骨骼肌按常规制作石蜡切片，后用小鼠抗人Mb单克隆抗体作为一抗，用HRP标记的羊抗小鼠IgG抗体作为二抗，采用免疫组织化学染色，利用图像分析技术测定平均光密度值，探讨其与死亡时间的相关性，并作统计分析和计算回归方程。 实验二：运用Western BloWing 技术研究人体死后，骨骼肌中肌红蛋白降解情况。将上述骨骼肌组织经匀浆、梯度离心、蛋白定量等步骤，制作蛋白样品液，随后用Western Blotting方法检测肌红蛋白，用发光法显示，以β-actin 做为内标参照，并用图像分析系统拍摄并测量其灰度值，计算两者之间的比值，探讨其与死亡时间的相关性，并作统计分析和计算回归方程。 实验三：运用肌原纤维小片化指数推断人体死亡时间。将上述肌组织经匀浆、梯度离心、蛋白定量等步骤，制作蛋白样品液，分光光度计在540nm处测其吸光度，以吸光度值×200作为肌原纤维小片化指数，探讨其与死亡时间的相关性，并作统计分析和计算回归方程。 结果： 1、死后12小时内，骨骼肌细胞内 Mb 的染色颗粒整体变淡，数量在减少；死后24小时，Mb 的染色颗粒分布不均；死后48小时，出现大面积的脱色区。 2、随着死亡时间的延长蛋白电泳条带Myoglobin/β-actin 的灰度值比值逐渐降低，以死后12小时内下降较明显，同免疫组织化学的结果相一致。 3、肌原纤维小片化指数随死亡时间的延长而逐渐上升，死亡12小时内变化较明显，而后趋于平缓，呈一定的线性相关。 结论： 机体死亡后，体内蛋白质逐渐降解，肌原纤维不断断裂分解，其改变随死亡时间的推移，呈现一定的规律性。肌原纤维小片化指数随着死亡时间的延长而逐步上升，且在死亡12小时内变化较明显，该方法操作简单易行、取材方便广泛，有望成为一种早期快速推断死亡时间的好方法。免疫组织化学方法和 WesternBlotting 方法结果均显示肌红蛋白随着死亡时间的推移而逐步降解，并在死后 12小时内变化较显著，运用图像分析软件能达到半定量的效果。肌红蛋白有望为推断死亡时间提供新的检测指标。