几种楸树花粉的离体萌发与花器官特异蛋白的初步研究

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本研究以几种楸树(Catalpa bungei C.A.Mey)花粉以及部分花器官为试材,研究了楸树花粉离体萌发和花粉管培养的优化方案,分析了楸树不同花器官的蛋白质特性。具体结果如下:(1)楸树花粉在液氮和-70℃超低温冰箱中贮藏的效果最好,超低温保存下的化冻方式以35~38℃水浴条件下化冻5min的解冻方式最适宜。(2)楸树花粉最宜的培养温度为24~28℃,最适pH值在5.0~5.6,最合适的聚乙二醇浓度为20g·L-1PEG-4000。蔗糖浓度为15g·L-1~25g·L-1花粉有较高的萌发率。(3)对几种楸树的不同花器官蛋白质含量分析表明,子房内的蛋白质含量最高,其次是花萼,而花柱或花瓣内的蛋白质含量最低。在SDS-PAGE电泳实验结果中,通过分析得到各种类型花器官蛋白分子量集中在100kD内,高、中、低分子量区域比较均匀地分布了约20条蛋白带,分子量为12.5kD的蛋白为不同楸树树种不同器官的共有蛋白,此外,各树种的不同器官也均有其特异表达的蛋白。(4)几种不同楸树花粉蛋白质分析表明:楸树不同树种间花粉蛋白质含量存在一定差异。对三种楸树花粉可溶性蛋白进行的电泳图谱对比分析发现,滇楸和老山楸树花粉蛋白集中在分子量30 kD左右,而连云港楸树花粉的蛋白主要为20 kD左右。对三种不同楸树花粉蛋白的IEF-PAGE电泳结果显示,三种楸树花粉的蛋白质分子量在24kD-135kD之间,而蛋白质等电点主要集中在p14-7之间。
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