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海洋微藻是海洋生态系统的初级生产力。海洋饵料微藻种类众多,营养丰富,是海洋水产养殖动物的天然开口饵料,在海洋水产育苗中有着广泛的应用。随着海水养殖业的高速发展,对饵料的需求量也越来越大,加强对海洋微藻饵料规模培养和保藏技术的研究开发,对生产实践具有重要意义和实用价值。本文重点探索了牟氏角毛藻(Chaetoceros muelleri)和湛江等鞭金藻(Isochrysiszhangjiangensis)这两种海洋饵料微藻的户外培养技术,并对牟氏角毛藻低温保藏过程中的营养损失进行了系统评价。主要研究结果如下:1、设计并构建了带有原位补碳—pH控制的微藻培养系统,能够实现在线补充CO2同时精确控制培养液pH值的双重功效。通过牟氏角毛藻的户外培养验证其效果表明,与对照相比,该系统能够显著提高牟氏角毛藻的生长速率高达1.85倍,细胞抵抗外界环境变化能力也明显增强;细胞内总脂肪酸(TFA)含量提高了14.5%,其中多不饱和脂肪酸(PUFA)和二十碳五烯酸(EPA)含量分别提高了17.1%和22.1%;C18:3含量提高最显著,高达57.4%。2、在上述培养系统中,比较研究了三种氮源(硝酸钠、尿素和碳酸氢铵)对牟氏角毛藻的生长和脂肪酸含量的影响。结果表明,使用碳酸氢铵时藻细胞比生长速率和细胞干重浓度最大,分别可达到0.23d-1和0.39g L-1;使用硝酸钠时利于总脂肪酸的积累,含量可高达96.95mg/g。PUFA和EPA含量在使用碳酸氢铵时最高,分别为27.18mg/g (31.15%TFA)和11.76mg/g(13.48%TFA)。说明碳酸氢铵是牟氏角毛藻生长和积累PUFA最好的氮源。3、比较研究了上述氮源对湛江等鞭金藻的生长、色素和脂肪酸含量的影响。结果表明。使用碳酸氢铵时可获得藻细胞的最大比生长速率和生物量浓度,分别为0.24d-1和0.262gL-1;使用硝酸钠时藻细胞叶绿素a和岩藻黄素含量最高,培养第二天达到最大值,分别为16.58mg/g和13.9mg/g;使用尿素时藻细胞TFA含量最高,达到137.22mg/g。使用硝酸钠、尿素和碳酸氢铵三种氮源时,PUFA含量分别为34.54mg/g (31.24%TFA)、53.68mg/g (39.12%TFA)和44.34mg/g(32.63%TFA),其中DHA含量分别为17.55mg/g(15.87%TFA)、29.58mg/g(21.56%TFA)、24.97mg/g(18.38%TFA)。说明氨态氮更有利于DHA的积累。4、碳酸氢铵作为碳源条件下,比较研究了三个盐度(20‰、25‰、30‰)对湛江等鞭金藻的上述影响,发现20‰盐度下藻细胞密度、生物量干重浓度和色素含量、DHA含量均达到最大,其中细胞密度和生物量干重浓度分别为5.5×106/ml和0.227gL-1,叶绿素a和岩藻黄素含量在培养第二天达到最大值分别为19.30mg/g和14.52mg/g,DHA含量为24.63mg/g (17.29%TFA)。最大比生长速率和生物量浓度分别为0.25d-1和0.39g/L。20‰盐度时总脂肪酸含量为124.31mg/g、PUFA含量达到了47.96mg/g,随着盐度升高总脂肪酸含量也逐渐升高、PUFA含量降低,呈现出与盐度的负相关性。5、比较研究了牟氏角毛藻浓缩液在-18℃和4℃下保藏后的营养损失率。结果表明,使用细胞浓度分别为1010/ml(A液)和109/ml(B液)的两种浓缩液,-18℃下不添加任何保护剂的对照组脂肪酸含量损失最小,EPA、PUFA和TFA的损失率(A液速冻组)分别为1.73%、2.13%和2.32%。A液的脂肪酸损失率显著小于B液的。缓冻组(以1℃/min的速率降至-18℃)脂肪酸损失率小于速冻组(直接在-18℃低温保藏)。4℃下保藏牟氏角毛藻浓缩液,脂肪酸损失情况与-18℃时相似,但脂肪酸损失率略高于-18℃时。6、鲜活牟氏角毛藻中蛋白质含量为干重的34.7%。浓缩液在-18℃下保藏2个月后, Af(A液速冻)、As(A液缓冻)、Bf(B液速冻)和Bs(B液缓冻)四组中蛋白质损失率分别为7.39%、8.39%、18.79%、16.11%,可见A浓缩液损失率明显小于B浓缩液液。4℃下牟氏角毛藻浓缩液保藏2个月后,蛋白质损失率要高于-18℃,A浓缩液的损失率为18.12%,B浓缩液的损失率为24.71%,A浓缩液的损失率明显低于B浓缩液。