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翻译后修饰是蛋白质发挥生物学功能的重要调节机制,SUMO化修饰是其中一种重要的修饰形式。SUMO化修饰在调节植物的生长发育中起到重要作用,如对拟南芥花期的调控、芽的发育调节和根发育的调节等。但关于水稻中SUMO化修饰的研究很少。我们通过生物信息学分析发现在水稻中STSl可能是一个新的SUMO E3连接酶,并对此功能进行了初步的研究,取得的结果如下:
1.利用RT-PCR分析了水稻不同时期和不同部位STS1的表达,结果发现在水稻初分蘖期,其分蘖芽中的含里高于其它时期;
2.通过对野生型水稻幼苗进行不同高温高光条件的处理,发现STS1基因的表达受高温高光的诱导。
3.利用RNAi技术,通过构建载体,转化水稻愈伤组织,获得STS1基因正反向过表达以及RNAi转基因水稻植株。PCR检测T0代分化植株全部都带有潮霉素标签,初步证明了我们已经得到了转基因植株。经过RT-PCR鉴定,在反向和RNAi转基因水稻个体中STS1的基因表达量明显低于野生型同时期的基因表达量。
4.表型初步分析T0代转基因水稻,发现反向和RNAi转基因水稻的分蘖数明显少于野生型或者正向过表达。经过统计,野生型分蘖之后反向过表达个体有47%未分蘖,而RNAi植株的未分蘖率达到了57%。
这些研究结果初步表明水稻STS1基因参与了水稻的分蘖调控。