小鼠胚胎心脏房室管发育及Lef1的表达规律

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoxiaohaizi319
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第一部分小鼠胚胎心脏房室管发育及Lef1的表达规律目的:探讨小鼠胚胎心脏房室管分隔、重塑过程以及Lef1在房室管发育过程中的表达规律。方法:25只胚龄10~15d小鼠胚胎心脏连续石蜡切片,用抗心肌肌球蛋白轻链Ⅱa单克隆抗体(MLC2a)、抗心肌肌球蛋白轻链Ⅱ多克隆抗体(MLC-2)、抗Tbx3多克隆抗体(Tbx3)、抗淋巴增强因子1单克隆抗体(Lef1)进行免疫组织化学染色和免疫荧光化学染色。结果:胚龄10~15d,房室管心肌呈MLC2a阳性、MLC-2阴性,同时表达Tbx3、Lef1。胚龄10d,心内膜垫形成。胚龄11~12d,房室管心内膜垫内细胞Lef1强表达,心外膜形成。胚龄12~13d,背腹侧房室管心内膜垫相互靠近且融合形成房室瓣,心外膜来源间充质细胞数量增加,部分表达Lef1。胚龄13d开始,部分心外膜来源间充质细胞穿过心肌延伸入壁侧房室瓣。胚龄15d,房室瓣膜基部直接与MLC2a阳性的房室管心肌相连。结论:小鼠胚胎房室管心肌发育为成体心脏房室环瓣膜基部的心肌;在小鼠胚胎心内膜垫融合、房室瓣形成过程中,Lef1在心肌和心外膜来源间充质细胞均有表达。第二部分转录因子Tbx3与小鼠胚胎第二生心区发育目的:探讨转录因子Tbx3在小鼠胚胎SHF的时空表达模式及其对SHF的调节作用。方法:30只胚龄9~15d小鼠胚胎心脏连续石蜡切片,用抗胰岛素增强子结合蛋白1多克隆抗体(isl1)、抗心肌肌球蛋白重链单克隆抗体(MHC)、抗心肌肌球蛋白轻链Ⅱa单克隆抗体(MLC2a)、抗Tbx3多克隆抗体(Tbx3)进行免疫组织化学染色和免疫荧光化学染色。结果:胚龄10~12d,咽腹侧间充质细胞isl1阳性表达逐渐增多,此期Tbx3的表达在咽腹侧内胚层减弱,在邻近腹侧内胚层的间充质细胞逐渐开始表达。胚龄9~11d,咽腹侧间充质isl1阳性细胞经动脉囊壁、心包腔背侧壁延续至流出道远端壁,Tbx3在这些部位均呈阴性。而流出道远端壁MHC呈弱阳性表达。在静脉端,咽腹侧的isl1阳性细胞经心背系膜延伸至DMP内,DMP内可见Tbx3散在表达。胚龄12~13d,SHF isl1呈阳性表达的细胞在动脉端延伸进入分隔后的动脉壁,该部位缺乏Tbx3表达;在静脉端,DMP逐渐开始心肌化,同时可见Tbx3阳性细胞分布。胚龄15d,DMP心肌化完成,Tbx3阳性细胞与室间隔顶部的房室束的阳性细胞相延续。结论:Tbx3并未对SHF前体细胞的迁移与分化进行直接的调节,但可能对其存在与增殖具有调节作用,且在p SHF的调节作用与动脉端SHF不同。
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