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本研究以淡紫拟青霉(YMF1.00630)为出发菌株，构建了能用于真菌转化的蛋白酶基因Ver112表达载体，并通过原生质体转化技术成功将其转入到出发菌株中，生测结果表明工程菌的杀线虫活性比淡紫拟青霉出发菌株有了较大的提高。研究结果对构建高效线虫生防制剂提供了很好的研究基础。
论文主要的研究结果如下：
1)重组表达载体的构建。利用PCR、酶切、去磷酸化、酶连、转化等分子生物学手段，构建了适用于真菌转化和表达的蛋白酶Ver112的重组质粒，该质粒含有完整的Ver112蛋白酶表达元件，可广泛应用于真菌的异源表达，为下一步实验奠定了基础。
2)原生质体的制备和转化子的筛选。确定了淡紫拟青霉原生质体制备与转化的条件：0.3 mol/L MgSO4，0.3 mol/L NaCl缓冲溶液中含5 mg/ml纤维素酶和5mg/ml蜗牛酶，180 rpm，28℃反应过夜(约12个小时)进行原生质体制备；100μl(2.0×107×1.0×108个/ml)原生质体，10μg经HindⅢ线性化的质粒DNA，30 UHindⅢ，150μl PTC进行转化，以蔗糖含量为0.6 mol/L的PDAS为再生培养基进行再生，并利用1000μg/ml的潮霉素抗性进行筛选，最终得到了稳定的转化子。
3)转化子的遗传稳定性和杀线虫活性分析。在抗性和非抗性平板上交替转接5次检测淡紫拟青霉转化子的稳定性，结果表明转化子的稳定性较高。同时，生测结果表明其杀线虫活性比野生型菌株提高了23.5％。
4)转化子中蛋白酶基因Ver112和pSP-3的表达分析。通过RT-PCR对蛋白酶基因Ver112和pSP-3在淡紫拟青霉的转化子和野生型的表达情况进行定性的分析研究，结果表明转化子能稳定的表达蛋白酶基因Ver112和pSP-3，蛋白酶基因Ver112的表达量变化与发酵液中蛋白酶活性的变化基本一致。
本论文的创新性主要体现在以下的两个方面：
1)构建了可以广泛用于食线虫真菌转化的表达载体，并成功的实现刀孢轮枝菌蛋白酶基因Ver112在淡紫拟青霉中异源表达。
2)工程菌株的杀线虫活性提高，为高效线虫生防工程菌株的构建奠定了良好的基础。