论文部分内容阅读
本研究采用96孔细胞培养板法研究外部环境因素对金黄色葡萄球菌菌膜形成的影响,并以此确定适宜的菌膜培养条件,对112株不同来源的金黄色葡萄球菌分离株的菌膜形成能力进行评价,同时调查了菌膜形成相关基因在分离株中的分布,分析菌膜形成与相关基因之间的关系。首先考察培养材料、培养时间、培养温度、营养条件等因素对菌膜形成的影响,确定亲水性细胞培养板、TSB培养基、37℃培养48h为适宜的菌膜体外培养条件,以此对112株分离株的菌膜形成量进行测定。结果显示,金黄色葡萄球菌普遍可以形成菌膜,112株菌中的30株(26.8%)具有较强的菌膜形成能力,21株(18.8%)菌膜形成能力中等,51株(45.5%)菌膜形成能力较弱,10株(8.9%)菌膜阴性;菌株来源与菌膜形成能力之间没有表现出一定的规律性,相同来源的不同菌株菌膜形成能力差异较大,说明菌株自身特性是影响菌膜形成的重要因素。在此基础上,采用ScaⅠ酶切法和多重PCR法对112株分离株进行agr基因分型,并使用普通PCR法调查菌膜形成相关基因ica,rbf及bap在112株分离株中的分布,分析上述菌膜相关遗传背景与菌膜形成之间的相关性。4种agr基因型在所调查的112株菌中均有分布,其中agrⅠ型菌株所占比例最高(61.8%),其次为agrⅢ型(20.9%)、agrⅡ型(11.8%), agrⅣ型最少(5.5%)。不同agr基因型的菌株在菌膜形成方面均存在着显著的差异,agrⅠ型菌株的菌膜形成能力强于其他型菌株。ica和rbf基因在金黄色葡萄球菌分离株中广泛存在,分别占98.2%和96.4%,对应的菌膜阳性率分别为90.9%和90.7% ,统计分析表明二者与菌膜形成之间存在着一定的相关性;bap基因仅存在8.0%的分离株中,但这部分菌株均具有较强的菌膜形成能力,说明bap在金黄色葡萄球菌菌膜形成中起着重要作用。但是,不携带上述基因的菌株同样具有菌膜形成能力,说明金黄色葡萄球菌还存在着其它菌膜形成及调控机制。