论文部分内容阅读
目的:研究不同剂量的60Co-Y射线对大鼠腮腺、颌下腺细胞凋亡率以及NBS1蛋白表达水平、分布的影响。探讨NBS1蛋白在唾液腺细胞放射性损伤中的作用。分析不同类型唾液腺组织放射敏感性的差异。方法:(1)选取近交系雄性成年Wistar大鼠50只,完全随机分为6组:正常对照组1组共10只,放射组5组,每组8只。60Co-γ射线作为放射源,以3Gy/次,1次/天分次照射。5个放射组大鼠接受累积辐射剂量分别为3Gy、6GY、9Gy、12Gy、15Gy。各放射组完成照射计划后2h将大鼠处死,同时随机处死2只对照组大鼠,取大鼠腮腺和颌下腺组织。(2)用TUNEL法检测各组大鼠腮、颌下腺组织中细胞凋亡率。(3)采用’Western Blotting蛋白印迹法检测各组大鼠腮腺、颌下腺组织中NBS1蛋白表达水平。(4)用免疫荧光技术检测不同组别唾液腺组织中NBS1蛋白表达及分布。(5)使用SPSS软件,对各组实验数据(x士S)进行协方差分析检验。P<0.05,则差异具有统计学意义。结果:(1)TUNEL检测法表明,大鼠经60Co-γ射线照射后,随着放射剂量的增加,其唾液腺细胞阳性率增高。当放射剂量>9Gy时,腮腺中细胞凋亡率开始下降(P=-0.001<0.05);放射剂量>12Gy时,颌下腺中细胞凋亡率下降俨0.015<0.05)。放射剂量对唾液腺细胞凋亡率有显著的影响。(2)免疫印迹法和间接免疫荧光染色结果显示,随剂量的递增,腮腺和颌下腺组织中NBS1蛋白的表达均呈现先增高后又逐渐下降的趋势;当放射剂量达到6Gy时,腮腺组织中的NBS1蛋白表达水平最高,随后逐渐下降(P<0.05);而颌下腺组织中的NBS1蛋白表达峰值出现在放射剂量为9Gy时,随后逐渐下降(P<0.05)。结论:(1)60Co-γ射线可致大鼠唾液腺细胞凋亡增多,并在一定范围内具有剂量依赖性。(2)唾液腺组织中NBS1蛋白的表达水平与放射剂量相关,随着剂量递增蛋白表达量呈先增高后下降的趋势。(3)推测NBS1蛋白可能参与大鼠唾液腺放射性损伤细胞的修复和凋亡诱导。在一定范围内NBS1蛋白与损伤表达相对维持一定的平衡,当超过一定剂量其表达受到抑制。(4)放射敏感性:腮腺>颌下腺,细胞凋亡率、NBS1蛋白表达水平可能间接反应唾液腺对放射的敏感性。