磁性二氧化硅复合微球的制备及其在DNA和蛋白质分离中的应用

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近年来,设计和合成单分散的磁性功能微球引起了广泛的关注,并被应用于生物分离,分子诊断和免疫测定等方面。其中,磁性二氧化硅微球由于其多方面的优点得到越来越多的关注。本文结合本组在磁性聚合物微球制备、功能化方面的长期工作,利用三种不同方法,成功制备了具有高磁含量单分散的二氧化硅复合微球,初步取得了以下几个方面的研究结果:1.采用正相细乳液法来制备单分散的可控成分的超顺磁性二氧化硅复合微球并应用于质粒DNA的分离。研究了不同的催化剂和磁流体用量对复合微球形态、磁性粒子性质和生物分离的影响。该研究工作提供了一种比以往更简单有效的方法来制备单分散性,快速磁场响应性的磁性二氧化硅复合微球,而这对于生物分离是非常重要的特性。并同商品磁性粒子的DNA分离效果进行比较,结果证明我们制备的磁性二氧化硅微球潜在的良好应用价值。2.采用改性的细乳液法来制备单分散高磁含量的二氧化硅复合微球,其磁含量可高达62.1%,这要远高于以往方法制备的超顺磁性二氧化硅复合微球的磁含量。接着,采用溶胶凝胶法,在该复合微球表面包覆介孔和无定形二氧化硅壳层,制备了核壳结构的磁性二氧化硅复合微球,提高微球表面的生物相容性。这也是首次在由磁性纳米粒子形成的复合微球表面包覆介孔二氧化硅壳层。进一步将磁性介孔和无定形的核壳微球用于质粒DNA的分离,并对分离结果加以分析比较,丰富了我们的研究体系。3.制备高磁含量的二氧化硅核壳微球,并对其表面进行改性,接枝聚丙烯酸线形链,用于溶菌酶的选择性吸附分离研究。首先,改进了以前的氧化沉淀法,缩短反应时间得到亚微米四氧化三铁磁簇。接着,采用溶胶凝胶法在该四氧化三铁磁簇表面包覆了可控厚度的二氧化硅壳层,制备Fe3O4@silica复合微球。然后,通过在二氧化硅表面接枝聚丙烯酸线形链,制备Fe3O4@silica-g-PAA复合微球,明显提高了磁性微球对溶菌酶的吸附量。该产物同以往的磁性吸附载体相比,在保证较高的蛋白吸附量的情况下,具有更快的磁场响应性和更短的吸附平衡时间,这对于发展磁性载体应用于批量化的生物分离具有重要意义。
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