拉雅松和细叶云南松挥发性成分的提取及生物活性研究

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本文研究了拉雅松和细叶云南松松针精油的提取工艺、化学成分及生物活性。主要研究结果如下:(1)采用水蒸气蒸馏法提取了细叶云南松松针精油,研究了料液比、提取时间、浸泡时间对细叶云南松松针精油提取率的影响。正交试验结果表明细叶云南松松针精油的最佳提取工艺为:料液比为1:12,提取时间为2h,浸泡时间为4h。(2)利用气相色谱-质谱联用技术定性定量分析了拉雅松和细叶云南松松针精油的化学成分。拉雅松松针精油主要成分为α-蒎烯、β-蒎烯、β-石竹烯、异松油烯、1,2,4a,5,8,8a-六氢化-4,7-二甲基-1-(1-甲基乙基)-萘。细叶云南松松针精油主要成分为α-蒎烯、β-石竹烯、1,2,4a,5,8,8a-六氢化-4,7-二甲基-1-(1-甲基乙基)-萘、β-毕澄茄烯、甘香烯。(3)采用滤纸片法测定了拉雅松和细叶云南松松针精油对细菌、霉菌、酵母的抑菌活性。采用平板稀释法测定了两种松针精油对测试菌的最小抑菌浓度。拉雅松松针精油对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌等4种细菌的最小抑菌浓度皆为40mL·L-1;对黄曲霉、黑曲霉、橘青霉、根霉等4种霉菌的最小抑菌浓度分别为>80mL·L-1、>80mL·L-1、>80mL·L-1、20mL·L-1;对热带假丝酵母、酿酒酵母、红酵母等3种酵母菌的最小抑菌浓度分别为160mL·L-1、80mL·L-1、80mL·L-1。细叶云南松松针精油对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌等4种细菌的最小抑菌浓度皆为40mL·L-1;对黄曲霉、黑曲霉、橘青霉、根霉等4种霉菌的最小抑菌浓度皆为80mL·L-1;对热带假丝酵母、酿酒酵母、红酵母等3种酵母菌的最小抑菌浓度分别为160mL·L-1、160mL·L-1、80mL·L-1。(4)采用清除DPPH·自由基和羟基自由基法研究了拉雅松和细叶云南松松针精油的抗氧化性能。实验表明,两种松针精油对自由基均有一定的清除能力,拉雅松松针精油对DPPH·自由基和羟基自由基的IC50分别为7.06mg·mL-1和0.48mg·mL-1,细叶云南松松针精油对DPPH·自由基和羟基自由基的IC50分别为12.16mg·mL-1和0.38mg·mL-1。(5)参照中华人民共和国国家标准GB/T13917.9-2009,以及采用三角瓶密闭熏蒸法分别研究了拉雅松和细叶云南松松针精油对致乏库蚊成虫的驱避和熏杀活性。当精油浓度分别为30.0%、40.0%、50.0%时,拉雅松松针精油对人体的有效保护时间分别为30min、120min、300min,细叶云南松松针精油对人体的有效保护时间分别为30min、90min、270min。在熏蒸作用时间分别为0.5h、1h、2h、4h、8h、24h,拉雅松松针精油对致乏库蚊的致死中浓(LC50)分别10.382%、2.157%、1.279%、0.669%、0.414%、0.309%,细叶云南松松针精油的致死中浓(LC50)分别为4.717%、0.970%、0.932%、0.646%、0.415%、0.216%。在精油浓度为6.4%的条件下,拉雅松松针精油对致乏库蚊的致死中时(LT50)为35.167min,细叶云南松松针精油的致死中时(LT50)为34.955min。
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