生防真菌以其环境友好、安全高效成为植物保护领域的研究热点。玫烟色虫草作为一种生防真菌对粉虱、蚜虫、蓟马等害虫具有良好防效,但其应用对环境温度、湿度和紫外辐射等条件要求较高,耐逆性良好的孢子发酵技术是制约生防真菌规模化生产的关键。本文以玫烟色虫草IF-1106为研究对象,探究了营养成分对玫烟色虫草菌丝生长、芽生孢子产量和耐热性的影响,并用离子色谱定量分析了重要的细胞内源物,以明确了解胞内小分子物质海藻糖与甘露醇与孢子耐热性的关系。为进一步建立若干金属离子和维生素的最优组合,采用响应面分析法设计并优化了培养基金属离子和维生素的组成,以期为玫烟色虫草高耐热性芽生孢子的发酵生产提供基础。主要研究结果如下:营养成分对玫烟色虫草芽生孢子耐热性与产量的影响优选碳源、氮源、磷源、微量元素、维生素的种类和浓度,确定适宜的培养基。研究结果表明,碳源为蔗糖,浓度为40 g/L、氮源为大豆蛋白胨,浓度为5 g/L、磷源为磷酸二氢钾,浓度为20 g/L,所产芽生孢子的GT50为1.91 h,产孢量为5.17×10~8孢子/m L;适宜的微量元素为Mn SO4·H2O、Cu SO4·5H2O、Fe SO4·7H2O、Fe Cl3·6H2O,适宜添加的维生素分别为VB2、VB5、VB6、VB9。响应面法优化培养基在单因素分析的基础上进行响应面分析,响应面结果的最优值与二次方程模型得到的值基本一致。优化后的微量元素组合为:Mn SO4·H2O 0.001%、Cu SO4·5H2O 0.001%、Fe SO4·7H2O 0.002%、Fe Cl3·6H2O 0.001%,为验证最佳工艺参数,进行了3次平行实验,实测值与预测值基本一致,相对误差小于5%。通过响应面优化法得到的最适宜的维生素组合为VB20.01%、VB50.004%、VB60.05%、VB90.006%。最终的培养基组合方案为(L-1):40 g蔗糖、5 g大豆蛋白胨、10 g Mg SO4·H2O、10 g KCl、20 g KH2PO4、Mn SO4·H2O 0.001%、Cu SO4·5H2O 0.001%、Fe SO4·7H2O 0.002%、Fe Cl3·6H2O 0.001%、VB20.01%、VB50.004%、VB60.05%、VB90.006%。玫烟色虫草胞内海藻糖与甘露醇在热胁迫前的生理响应海藻糖与甘露醇均为玫烟色虫草重要的胞内物质。从总体来看,玫烟色虫草芽生孢子耐热性高的培养基所产芽生孢子的胞内海藻糖含量较低,但并非所有胞内海藻糖含量低的芽生孢子其耐热性都高。玫烟色虫草IF-1106的杀虫活性为观察优化后的培养基所产芽生孢子的毒力情况,将其所产的芽生孢子对桃蚜、粉虱、小菜蛾进行毒力测定。研究结果表明,在孢悬液喷雾接种浓度分别为1.0×10~6、1.0×10~7和1.0×10~8孢子/m L时,玫烟色虫草芽生孢子对桃蚜Myzus persicae的校正防治效果均为100%,致死中时LT50为2.1 d、2.13 d、2.08 d;对温室白粉虱Trialeurodes vaporariorum的校正防治效果分别为100%,致死中时LT50为3.71 d、2.99 d、2.77 d;对小菜蛾Plutella xylostella的校正防治效果分别为10.34%、44.83%、65.52%,致死中时LT50为10.91 d、6.36 d、4.78 d。表明玫烟色虫草菌株芽生孢子对以上3种害虫均有较强的致病力,能够发挥昆虫病原真菌对害虫的防治潜力。