近交系小耳猪复合异种骨实验研究

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目的 观察经脱蛋白处理近交系小耳猪松质骨及与小耳猪BMP(sepBMP)复合后的结构特点;探讨小耳猪异种复合骨的骨诱导活性以及免疫学特性。 方法 (第一部分)对小耳猪松质骨粒脱蛋白处理后与小耳猪BMP进行复合,采用扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察其结合前后的结构特点;将脱蛋白松质骨、sepBMP及sepBMP复合骨分别植入BALB/c小鼠股部肌袋中,术后定期对移植组织进行放射学、组织学及碱性磷酸酶(ALP)检测。(第二部分)将三种不同抗原性小耳猪松质骨粒分别与sepBMP进行复合后植入三组BALB/c小鼠右侧股部肌袋中,于术后2、7、14及28天行小鼠脾细胞培养上清的白细胞介素-2(IL-2)活性检测及植入组织的组织学观察、成骨图象分析及ALP活性检测。 结果 (第一部分)SEM显示小耳猪脱蛋白松质骨孔隙规则,孔壁光滑,sepBMP均匀结合于其内外面;X线片显示复合骨组术后14天开始局部密度增加明显;组织学观察复合骨组表现出良好的成骨效应,sepBMP组成骨效应明显弱于复合骨组(P<0.01),单纯松质骨组未见成骨;三组中,复合骨组ALP活性最高,术后7天达到峰值,中后期仍较明显,sepBMP组次之,单纯松质骨组最低(P<0.01)。(第二部分)各组IL-2生成量以术后第2天最高,三组中新鲜载体组在术后不同时间点表达最强,部分脱抗原及脱抗原组最弱(P<0.01);术后7、14及28天部分脱抗原及脱抗原组表现良好的成骨活性及组织相容性;ALP活性以部分脱抗原及脱抗原载体组最高,新鲜载体组最低 (P<0.01);术后28天成骨量图象分析显示新鲜载体组明显低于部分脱抗原及脱抗原组(P<0.01):在IL一2活性及成骨活性方面,部分脱抗原及脱抗原组间无显著性差异(P>O.05):IL一2生成量与ALP活性及组织成骨量呈显著负相关(P<0 .01)。结论经脱蛋白处理的小耳猪松质骨具有良好的结构特点,与sePBMp得到充分的复合,移植后表现良好的骨诱导活性;不同抗原性载体导致免疫反应的强弱与其诱导成骨能力呈负相关,免疫排斥造成骨诱导能力的减弱,部分脱抗原及脱抗原载体组呈现明显的低免疫原性及良好的骨诱导能力。
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