外周血淋巴细胞亚群在帕金森病中的作用的研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:haoyigyaoatcs31
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目的:通过对帕金森病(Parkinson’s disease, PD)患者外周血淋巴细胞亚群的检测,分析其改变和病程的相关性,为提供安全有效的免疫治疗方法提供实验依据。观察α-Synuclein (α-Syn)对PD患者外周血淋巴细胞亚群分布改变的影响,初步探讨其机制。方法:1.采用病例-对照研究,选取PD患者34例,健康对照20例,于知情同意的情况下采集静脉血。淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)后,采用流式细胞术(Flow cytometry, FCM)对所有研究对象进行CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD19+在淋巴细胞中百分率的检测,分析各亚群百分率与病程的相关性。2.从PD组和对照组中选取年龄性别匹配的研究对象各10例分离PBMCs后,给予α-Syn处理。72小时后用FCM检测其对外周血淋巴细胞亚群百分率的影响。3.应用细胞凋亡试剂盒和FCM检测α-Syn对淋巴细胞凋亡的影响。4.应用JC-1染料染色和流式细胞术检测α-Syn对淋巴细胞线粒体膜电位的影响。结果:1.PD组患者外周血淋巴细胞CD3+的百分率高于对照组,差异没有统计学意义(P>0.05);PD组患者外周血淋巴细胞CD3+CD8+的百分率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对34例PD患者进行H-Y评分与外周血淋巴细胞CD3+、CD3+CD8+百分率的相关分析显示:H-Y评分与外周血淋巴细胞CD3+百分率呈正相关(r=0.530,P<0.05)两者回归系数具有显著意义(P<0.01);H-Y评分与外周血CD3+CD8+T淋巴细胞百分率呈正相关(r=0.597,P<0.05)两者回归系数具有显著意义(P<0.01)。2.以10μg/ml终浓度的α-Syn处理PD组和对照组BMCs72hs, PD组CD3+CD4+百分率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.浓度为10μg/ml的α-Syn在作用PBMCs48hs后,FCM检测结果显示PD组CD3+CD4+淋巴细胞的凋亡率为(28.14±2.17)%,高于PD组(7.01±0.49)%,结果有统计学意义(P<0.05)。4.浓度为10μg/ml的α-Syn作用PBMCs48hs后,经JC-1染色结合FCM检测细胞线粒体膜电位,PD组淋巴细胞线粒体膜电位损失高于对照组(P<0.05)。结论:1.PD患者外周血淋巴细胞CD3+CD8+的百分率升高可能是PD病情加重的危险因素,其百分率与患者运动障碍程度成正相关。2.α-Syn可能通过降低淋巴细胞线粒体膜电位,从而诱导淋巴细胞凋亡
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