Livin和Bcl-2蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

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目的:细胞凋亡是体内清除衰老、退化和受损细胞的一个重要途径,细胞凋亡与增殖的动态平衡在维持多细胞动物的生长发育和正常组织器官的结构与功能中起着重要作用。一旦凋亡过程受到抑制,使基因发生突变的细胞得以生存和增殖,最终会导致肿瘤的发生。细胞凋亡与癌变的关系引起人们的广泛关注,成为目前分子细胞生物学的一个新的研究热点。Livin(ML-IAP/KIAP)是IAP(inhibitor of apoptosis protein)家族的新成员,是重要的细胞凋亡调节因子,其组织分布具有明显的细胞选择性,特异性表达于人的胚胎组织以及大多数人类实体瘤细胞。随着研究的深入,Livin在IAP家族中抑制细胞凋亡、诱导细胞增殖的作用愈来愈发引起人们的关注和重视。Bcl-2(B-cell lymphoma/leukemia-2)基因是从滤泡性淋巴瘤细胞中分离出来的一种癌基因,为细胞凋亡或程序性死亡过程的拮抗基因。Bcl-2在多种正常组织如:骨髓、表皮、淋巴组织及各种腺体广泛表达。在多种人体肿瘤中也检测到Bcl-2表达,并与肿瘤的分化、抗药性、预后等有关。本研究旨在通过采用流式细胞技术检测Livin和Bcl-2在食管鳞状细胞癌中的表达情况,来探讨Livin与Bcl-2在食管鳞状细胞癌发展过程中的表达规律及其相关性,为食管癌的临床治疗研究提供科学的理论依据。方法:采用流式细胞分析技术对食管鳞状细胞癌患者的癌组织进行Livin和Bcl-2的计量分析。肿瘤组织及远癌组织标本取自河北医大第四医院胸外科2008年5月~2008年8月行根治手术的食管鳞状细胞癌患者标本50例,其中男性32例,女性18例,年龄43~72岁,根据国际抗癌联盟(UICC)食管鳞状细胞癌国际TNM分期标准:T18例,T210例,T332例,N027例,N123例。以同期50例食管远癌组织作为对照。用组织剪取新鲜标本约0.5cm×0.5cm×0.5cm大小的组织块1-2块,用75%酒精固定,依次进行过滤、离心、标抗等步骤,最后用流式细胞仪对标抗好的单细胞悬液组织进行流式分析,以PBS液作为阴性对照,只加二抗(FITC)作为阳性对照,检测结果以平均荧光强度( X±S)表示。用SPSS13.0统计软件对检测结果进行统计分析,包括t检验、方差分析、Pearson相关分析等。结果:1 Livin在不同组织中的表达情况:Livin在食管鳞状细胞癌组织中的平均荧光强度为197.87±50.13,在癌旁组织中的平均荧光强度为78.56±39.81,两组相比较,有统计学差异性(P<0.05)。2 Bcl-2在不同组织中的表达情况:Bcl-2在食管鳞状细胞癌组织中的平均荧光强度为322.93±54.77,在癌旁组织中的平均荧光强度为164.49±47.46,在癌组织和癌旁组织之间存在显著的统计学差异性(P<0.05)。3 Livin和Bcl-2在食管鳞状细胞癌组织中的表达与临床病理特征的关系:食管鳞状细胞癌患者的年龄、性别、肿瘤的组织分型与Livin及Bcl-2表达无关;Livin及Bcl-2在食管鳞状细胞癌组织中的表达与淋巴结转移及癌组织浸润深度之间有统计学差异(P<0.05)。4 Livin和Bcl-2与食管鳞状细胞癌国际TNM分期(UICC)的关系:食管鳞状细胞癌中Livin在Ⅰ期的平均荧光强度为108.93±18.07,在Ⅱa期的平均荧光强度为160.96±36.70,在Ⅱb期的平均荧光强度为194.31±32.03,在Ⅲ期的平均荧光强度为241.91±22.58,各期之间存在显著的统计学差异性(P<0.05);Bcl-2在Ⅰ期的平均荧光强度为227.13±21.34,在Ⅱa期的平均荧光强度为271.97±23.93,在Ⅱb期的平均荧光强度为322.63±36.25,在Ⅲ期的平均荧光强度为369.37±23.37,各期之间存在显著的统计学差异性(P<0.05)。5 Livin和Bcl-2之间的相互关系:癌组织中,Livin的平均荧光强度表达为197.87±50.13,Bcl-2的平均荧光强度表达为322.93±54.77,相关检验其相关系数r=0.856,P<0.01;癌旁组织中,Livin的平均荧光强度表达为78.56±39.81,Bcl-2的平均荧光强度表达为164.49±47.46,相关检验其相关系数r=0.081,P>0.05。结论:1 Livin和Bcl-2在食管鳞状细胞癌组织中的含量表达明显高于它们在食管癌旁组织中的含量表达。2 Livin及Bcl-2在食管鳞状细胞癌组织中的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的分化程度无关。Livin蛋白及Bcl-2蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达与淋巴结转移及癌组织浸润深度有关,有淋巴结转移的癌组织与浸润程度较深的癌组织Livin蛋白与Bcl-2蛋白的表达较高。3 Livin及Bcl-2在食管鳞状细胞癌组织中的表达与食管鳞状细胞癌TNM分期有关,随着分期的增加Livin及Bcl-2的表达逐渐增高。4在食管鳞状细胞癌组织中,Livin和Bcl-2两种蛋白的含量表达关系呈正相关。当组织中Livin蛋白呈高表达时,Bcl-2蛋白亦呈高表达,反之,Bcl-2蛋白呈现低表达。
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