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应激刺激对痛觉反应具有调控作用。根据应激源持续时间和强度的不同,应激可以分为急性应激（acute stress,AS）和慢性应激（chronic stress,CS）,一般情况下,AS可以使机体产生镇痛（stress-induced analgesia,SIA）现象,而CS则可以使机体产生痛觉敏化（stress-induced hyperalgesia,SIH）现象。除此之外,还有研究发现,应激和疼痛与情绪障碍之间存在着非常复杂的关系,应激会增加机体患有精神疾病的风险,并且会加剧精神疾病的严重程度,研究发现,慢性应激可诱导海马中CA3树突回缩,CA3或齿状回细胞凋亡,这使得下丘脑-垂体-肾上腺（hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA）轴活动受损,最终使机体情绪异常;同时疼痛也会使个体产生焦虑、抑郁等精神性疾病,甚至会损伤个体的思维认知和逻辑推理能力;另外有研究指出,患有精神性疾病的个体通常会伴随着HPA轴的过度活跃以及血清素能和去甲肾上腺素能系统的功能障碍,从而进一步加重个体疼痛疾病的症状。综上所述,由于疼痛和应激与精神性疾病之间都存在着复杂的关系,这就使得临床上疼痛疾病的治疗面临着更大的挑战。研究发现阿片肽物质通过内源性疼痛控制系统发挥着强大的镇痛作用,阿片肽是一类与神经调节相关的蛋白质,内源性阿片肽主要包括β-内啡肽、脑啡肽和强啡肽,他们可以激活阿片系统中的μ受体、δ受体和K受体。当机体处于危险或厌恶环境中时,其所产生的应激反应是通过内源性阿片的释放进行介导、调节和终止的。有关中枢和周围神经性疼痛的研究已经报道了阿片受体激动剂,特别是阿片μ受体（mu opioid receptor,MOR）激动剂吗啡的镇痛作用,临床上疼痛患者也通常使用阿片受体激动剂类药物进行治疗。虽然到目前为止阿片受体激动剂类药物被广泛应用于疼痛疾病的治疗,但其对疼痛疾病治疗的副作用引起了人们较大的关注,比如临床上发现,疼痛患者如果长期服用阿片类镇痛药就会出现免疫学、身体依赖性甚至精神依赖性等问题,这极大地限制了阿片类镇痛药物的使用范围。同时,还有研究发现,在大多数应激环境中,内源性阿片受体可以产生镇痛效应,但是当机体反复暴露于应激源中时,其体内的内源性阿片物质释放频率增加,这将导致阿片受体被过度激活、脱敏并最终导致内源性阿片受体产生镇痛效应的耐受性,到目前为止,大多数研究认为SIA是由脑干疼痛调节系统介导的,但是对于SIH具体调节机制的研究却仍然不是非常清楚。综上所述,本课题采用强迫游泳应激的方式构建痛觉敏化动物模型,热辐射测试痛阈,并利用基因敲除小鼠来探究全身性μ受体、星形胶质细胞、γ-氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid,GABA）能神经元和谷氨酸能神经元上的μ受体在慢性应激诱导痛觉敏化和相关情绪形成中的作用,结果如下:1.聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）鉴定各种基因修饰小鼠的基因型,结果显示基因敲除小鼠模型构建成功。2.在反复强迫游泳过程中,小鼠在游泳测试中的不动时间会随着游泳天数的增加而增加,并且第6天强迫游泳的不动时间要明显高于第1天不动时间,说明小鼠经过游泳应激6天后出现了抑郁样情绪。3.与强迫游泳应激前相比,野生型小鼠经过应激后,其甩尾潜伏期明显降低,说明反复强迫游泳应激会使野生型小鼠的痛阈降低,即出现痛觉敏化现象,说明反复强迫游泳应激诱导的痛觉敏化动物模型构建成功。4.腹腔注射生理盐水组小鼠经过应激后出现了痛觉敏化现象,表现为应激后的甩尾潜伏期明显降低,而腹腔注射μ受体拮抗剂β-氟那曲明盐酸盐（β-Funaltrexamine hydrochloride,β-FNA）组小鼠经过应激后没有出现痛觉敏化现象,表现为甩尾潜伏期在应激前后没有变化;同窝野生对照组小鼠经过应激后出现了痛觉敏化现象,表现为应激后的甩尾潜伏期明显降低,而Oprm1全身敲除（CMV-Oprm-/-）小鼠经过应激后没有出现痛觉敏化现象,表现为甩尾潜伏期在应激前后没有变化。以上结果表明μ受体参与调节应激诱导痛觉敏化的形成过程。5.同窝野生对照组小鼠经过应激后出现了痛觉敏化现象,表现为应激后的甩尾潜伏期明显降低,星形胶质细胞Oprm1特异性敲除（GFAP-Oprm-/-）小鼠和谷氨酸能神经元Oprm1特异性敲除（vGlut1-Oprm-/-）小鼠经过应激后也出现了痛觉敏化现象,表现为应激后的甩尾潜伏期明显降低,而GABA能神经元Oprm1特异性敲除（Gad2-Oprm-/-）小鼠经过应激后没有出现痛觉敏化现象,表现为甩尾潜伏期在应激前后没有变化。以上结果表明GABA能神经元是μ受体参与调节应激诱导痛觉敏化的主要靶点。6.与未进行强迫游泳应激的小鼠相比,经过游泳应激的小鼠在旷场中央区域和高架十字迷宫开臂中的停留时间明显降低;与进行强迫游泳应激的同窝野生型小鼠相比,CMV-Opnm-/-、GFAP-Oprm-/-、Gad2-Oprm-/-和 vGlut1-Oprm-/-小鼠在旷场中央区域和高架十字迷宫开臂中的停留时间也明显降低,但是在悬尾测试中的不动时间没有显著性变化。以上结果说明反复强迫游泳可诱发小鼠产生焦虑/抑郁样情绪,而μ受体在其中的作用并不明显。综上所述,经过反复强迫游泳应激后,小鼠会出现痛觉敏化现象,这一行为学的改变与μ受体的参与调节有关,且GABA能神经元是μ受体参与调节应激诱导痛觉敏化的主要靶点;另外强迫游泳应激可诱发小鼠产生焦虑/抑郁样情绪,但μ受体在其中的作用并不明显,有待于作进一步的研究。