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第一部分NF-κB与PLA2在脂多糖致大鼠急性肺损伤中的作用机制目的:研究脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)所致急性肺损伤(Acute lung injury, ALI)的病理过程,探讨NF-κB与PLA2在LPS所致ALI中的作用机制。方法:SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组。静脉注射LPS(6mg/kg)复制ALI的动物模型。对照组静脉注射等公斤体重的生理盐水。每组各分为注射后2小时、4小时、8小时、12小时四个亚组,每组8只大鼠。分别于各时间点麻醉后活杀,取肺组织测定肺湿/干重比,石蜡包埋切片HE染色行肺组织病理评分,肺泡支气管灌洗提取肺泡巨噬细胞(Alveolar macrophages, AM)中性红法测定吞噬功能、TUNEL法检测凋亡率及免疫组化法检测核因子-κBp65蛋白(Nuclear factor-κBp65, NF-κBp65)表达,逆转录-多聚酶链反应(Reverse transcription- polymerase chain reaction, RT-PCR)法检测AM的分泌型磷脂酶A2ⅡA型(Secretory phospholipase A2 typeⅡA, sPLA2ⅡA)、Bcl2、Bax mRNA的转录表达。结果:与对照组各对应时间点相比,模型组肺干/湿比、肺组织病理评分、AM的NF-κBp65表达及凋亡、AM的sPLA2ⅡA基因表达增加(P<0.01),AM吞噬功能、Bcl2、Bax基因的表达下降(P<0.01)。结论:1.采用尾静脉注射LPS方法可成功地复制大鼠急性肺损伤模型。此方法操作简单、易行、结果稳定。2.注射LPS后,呈时间依赖性地促进AM sPLA2ⅡA基因表达、NF-κB活化及AM的凋亡,肺损伤程度亦随之加重,提示LPS致ALI与AM的NF-κB活化、sPLA2ⅡA基因表达、AM的凋亡相关。第二部分氯喹及PDTC防治脓毒症大鼠急性肺损伤的作用机制目的:研究脂多糖(LPS)所致急性肺损伤(ALI)的病理生理过程,探讨氯喹及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对LPS所致ALI的保护性作用机制。方法:SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、氯喹干预组、PDTC预防组。静脉注射LPS(6mg/kg)复制ALI的动物模型。氯喹干预组是在注射LPS后立即予以氯喹(30mg/kg)腹腔注射,PDTC预防组是在注射LPS前30min予以PDTC(120mg/kg)腹腔注射,对照组静脉注射等公斤体重的生理盐水。测定肺湿/干重比,肺组织病理评分,肺泡巨噬细胞(AM)凋亡率及核因子-κBp65(NF-κBp65)表达,并检测AM的sPLA2ⅡA、Bcl2、Bax基因的表达。结果:与对照组相比,模型组肺干/湿比、肺组织病理评分、AM的NF-κBp65表达及凋亡、AM的sPLA2ⅡA基因表达增加(P<0.05),AM Bcl2、Bax基因的表达下降(P<0.05)。与模型组相比,氯喹干预组和PDTC预防组上述改变得以逆转,肺损伤程度明显减轻(P<0.05)。结论:1.预防性予以PDTC可抑制AM NF-κB活化,抑制sPLA2ⅡA基因表达,促进Bcl2基因表达,Bcl2/Bax比值增高,抑制AM凋亡,对LPS所致的ALI有一定的保护作用。2.早期使用氯喹可下调AM sPLA2ⅡA基因表达,上调Bcl2基因表达,抑制NF-κB活化,增强AM吞噬功能,减少AM凋亡。早期应用,对LPS所致的ALI有一定的治疗作用。