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目的：研究有丝分裂阻滞缺陷蛋白MAD2B在正常脑组织及神经胶质瘤组织中的表达水平，探讨MAD2B的缺失是否可以提高人脑胶质瘤细胞对γ射线的敏感性及其作用机制。 方法： 1.体外培养人脑胶质瘤细胞(U251细胞系和A172细胞系)。 2.RNA干扰技术。 3.细胞克隆形成实验。 4.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术。 5.流式细胞仪检测细胞凋亡。 6.蛋白质印迹法(Western Blot)技术。 7.免疫组织化学分析技术。 结果： 1.MAD2B在人脑胶质瘤和正常脑组织中的表达。应用RT-PCR法检测30例人脑胶质瘤和正常脑组织样本中MAD2B的mRNA表达水平。30例人脑胶质瘤标本中有12例(40％)MAD2B的mRNA表达显著增加。相反，在正常脑组织样本中几乎检测不到MAD2B的mRNA的表达。应用免疫组化染色方法分析组织微阵列(TMA)，检测脑胶质瘤中MAD2B的蛋白表达水平。TMA包含的104例脑胶质瘤样本中有44例(44.2％)出现明显的MAD2B核染。提示人脑胶质瘤组织中MAD2B的表达不被抑制。 2.MAD2B shRNA质粒构建。针对MAD2B将shRNA质粒加载到U251MG和A172G胶质瘤细胞株中，RT-PCR和WESTERN印迹杂交法检测结果显示：与对照组比较，重组质粒载体转染U251MG和A172G细胞株后，MAD2B的表达被完全抑制。 3.沉默MAD2B对辐射诱导的细胞毒性的影响。细胞克隆形成实验和Western Blot方法的检测结果证实：沉默MAD2B可以增强人脑胶质瘤细胞对电离辐射的敏感性，这种作用通过促进细胞凋亡来完成。 4.沉默MAD2B对电离辐射诱导的基因组损害的影响。Western Blot方法的实验结果显示：与对照组相比，γ射线照射后的MAD2B shR3NA细胞中γ-H2AX的表达水平明显增高。提示MAD2B的失活增加了电离辐射诱导的基因破坏。 结论：通过RT-PCR和免疫组织化学分析发现，与正常脑组织相比MAD2B在人脑胶质瘤标本中过度表达。沉默MAD2B可以明显降低胶质瘤克隆细胞的存活率，并且明显增强了电离辐射诱导细胞凋亡的作用。这一效果与caspase-3的激活以及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的暴露息息相关。此外，MAD2B的裂解将增强辐射诱导的基因组损伤，并随组蛋白H2AX的磷酸化(γ-H2AX)而增强。本研究发现，MAD2B在胶质瘤组织中过分表达，因此以MAD2B作为目的基因可能成为今后改善胶质瘤放射治疗敏感性的潜在方法。