由于两栖类具有水陆两栖的生活周期、高渗透性的皮肤和无羊膜的卵，使得两栖动物对周围环境的化学污染物很敏感。据对全球范围内两栖动物种群的调查发现，世界各地的青蛙、蟾蜍及其它两栖动物的数量在日益减少，目前已经证实了环境污染物（如各种杀虫剂、除草剂、化学肥料等）在两栖动物种群的衰退中起了关键性作用。我国既是农药生产大国，又是农药使用大国，农药在日常使用过程中，只有大约1％作用于靶生物，其余的或残留于土壤中，或通过径流进入水域，影响土壤和水体中的生物。早先对两栖类的毒性试验多采用重金属离子作为试验毒物，随着环境污染的日益加重，21世纪以来有关除草剂、杀虫剂等农药的监测报道也越来越多。研究表明，农药不仅能够影响无尾两栖类的存活率、生态、行为，还能抑制蛙类幼体生长发育、对蛙类产生生理毒性、遗传毒性的影响。　　 多疣狭口蛙（Kaloula verrucosa）隶属于无尾目姬蛙科（Microhylidae），属中国西南地区特有种，原是昆明城郊农田、水塘和沟渠的常见蛙类。随昆明城镇化进程加快和农业生产中农药使用量的增加，多疣狭口蛙分布逐渐萎缩，种群数量呈下降趋势。敌敌畏是我国农田、水果、蔬菜种植中最广泛使用的杀虫剂，为了解农药对蛙类胚胎和不同发育期蝌蚪的急性、亚急性毒性，本课题以敌敌畏作为实验毒物，以多疣狭口蛙为研究对象，研究敌敌畏对其胚胎及蝌蚪的毒性影响。研究的内容包括：（1）敌敌畏对多疣狭口蛙胚胎的出膜率、畸胎率、死亡率的影响；（2）敌敌畏对多疣狭口蛙第25期、26期、35期和42期等4个不同发育期蝌蚪的急性毒性影响；（3）敌敌畏对多疣狭口蛙第25期、26期和35期蝌蚪的亚急性毒性影响。以期获得敌敌畏对多疣狭口蛙胚胎和蝌蚪的毒性数据，为水质监测、保护两栖动物提供数据，并为发展两栖动物作为水体监测的指示生物提供依据。　　 对胚胎期的试验结果表明，敌敌畏对多疣狭口蛙胚胎的出膜率、畸胎率和存活率均有影响，不同浓度的敌敌畏溶液能够不同程度地降低多疣狭口蛙胚胎的出膜率和存活率，并具有明显的致畸作用。经敌敌畏处理后，多疣狭口蛙胚胎主要出现两种异常胚胎，一种是胚胎发育停止，胚体腐烂。另一种是发育为畸形胚胎。各期胚胎所产生的畸胎类型基本一样，畸形胚胎与正常胚胎在形态上有很大差异，如：腹部膨胀呈透明状，脊柱弯曲，全身皱缩卷曲等。在所处理的5个时期的胚胎中，原肠晚期胚胎较其余4个时期敏感。其原因可能是原肠胚时期为构建内部器官作准备，胚胎除了单纯的细胞分裂和外形的改变之外，在原肠形成之后胚胎的发育需要大量的特异蛋白质，细胞内DNA复制、转录以及蛋白质的合成都很活跃。所以，原肠胚期对敌敌畏的影响十分敏感，致畸致死率也就很高。　　 急性毒性试验结果表明：在水温19.5-22.0℃条件下，敌敌畏对各期蝌蚪96h LC50值分别为11.3，14.3，13.8和6.1mg/L，各期蝌蚪对敌敌畏的敏感顺序为42期>25期>35期>26期。由此得出敌敌畏对25期、26期和35期蝌蚪属中等毒性，对42期蝌蚪则表现为高毒，建议农药施用应尽量避开蝌蚪的变态期进行。根据实验观察，中毒蝌蚪表现为呆滞、反应迟钝、尾部弯曲、腹面向上静卧于盆底或悬浮于水面，并出现侧游、腹面朝上在原地摆动尾部、翻筋斗、螺旋游动等行为。死亡蝌蚪尾部均出现不同程度的弯曲，体色发黑，腹部发白，心脏血液变黑，鳃部有黑色血丝，身体有腐烂现象。根据蝌蚪中毒症状和死亡症状，分析其死亡原因主要有两种，一种是窒息死亡，另一种是生理机能衰竭死亡。根据本课题的研究结果，并综合前人的研究，作者认为：在蛙类幼体发育过程中，由于生理机能和神经系统的逐渐完善，胚胎期（出膜后）随着发育阶段的增长对外界环境的耐受性增强；蝌蚪期随着发育阶段的增长对外界环境的敏感性增强。鉴于42期蝌蚪意外死亡率高的特点，认为不宜采用变态期蝌蚪进行急性毒性试验。　　 亚急性毒性试验结果表明：敌敌畏对多疣狭口蛙蝌蚪的全长、尾长、体宽、体重和体积的增长有明显的抑制作用。经敌敌畏溶液处理20d后，各项生长指标均呈现负增长趋势。这主要是实验过程中处理组的蝌蚪摄食量减少，排泄速率明显降低，运动频次降低，蝌蚪只能靠消耗体内能量物质维持生命，蝌蚪新陈代谢异化作用大于同化作用，致使蝌蚪逐渐消瘦。此外，根据敌敌畏的中毒机理分析，较高浓度的敌敌畏溶液使蝌蚪的酯酶同工酶活性降低，从而影响蝌蚪正常的生长发育，同样是造成蝌蚪过度消瘦的原因。