研究目的:化疗药物治疗肿瘤存在严重的毒副反应，如何降低肿瘤治疗中化疗药物对机体产生的毒性是目前抗肿瘤治疗领域一大瓶颈问题。脂质体脂质体是磷脂分子分散在水中形成的具有脂质双分子层的囊泡，是一种药物新剂型。将化疗药物包载在脂质体中，可以提高化疗药物的靶向性，缓释性，降低药物毒性，提高药物稳定性等作用。超声可通过空化效应和热效应诱导细胞凋亡，增强肿瘤细胞对化疗的敏感性，结合微泡的超声介导治疗技术具有较好的安全性，在肿瘤治疗领域具有较好的应用前景。本实验将超声微泡介导技术与脂质体技术有机融合，以盐酸阿霉素为模型药物，系统研究阿霉素脂质体、脂质体微泡的制备，质量评价，超声参数的优化，体内外抗肿瘤效果评价，提高肿瘤治疗的安全性和有效性。　　 研究方法:　　 1、以薄膜分散法制备包载盐酸阿霉素的脂质体溶液，通过外观溶液观察以及粒径和Zata电位的测定，制备出符合注射要求的盐酸阿霉素脂质体注射液。　　 2、根据已有自主知识产权的微泡制备方法，以产权要求的相同的处方与工艺条件制备脂质微泡。以冻干形态及复溶性、脂质微泡浓度、脂质微泡形态、脂质微泡粒径及粒径分布作为考察指标，制备出符合超声空化条件的脂质微泡。　　 3、为考察低频超声联合微泡产生的空化效应对细胞的影响，本实验设计了四个不同超声强度（0.3，0.6，1.0和1.5W/cm2）联合5个不同微泡浓度梯度进行筛选（5，10，15和20％，V/V），得出最优超声参数。　　 4、以人乳腺癌MDA-MB-435细胞系为研究对象，通过MTT实验考察超声空化效应对细胞的影响，单纯应用盐酸阿霉素和盐酸阿霉素脂质体的细胞毒性比较，以及联合阿霉素脂质体的细胞毒性;通过流式细胞仪检测技术检测肿瘤细胞对不同处理方式后药物的吸收情况。　　 5、用腋下接种人乳腺癌MDA-MB-435细胞株的方法，建立雌性裸鼠肿瘤模型。用盐酸阿霉素和盐酸阿霉素脂质体为治疗药物，通过三种不同的处理方式(①超声微泡与盐酸阿霉素脂质体同步处理;②先超声空化再尾静脉注射盐酸阿霉素脂质体;③先尾静脉注射再超声微泡空化）考察超声微泡联合盐酸阿霉素脂质体的抗肿瘤效果。以肿瘤体积的增长率来判断动物药效。　　 研究结果:　　 1、本实验制备的阿霉素脂质体平均粒径为197nm，粒径对称分布，分散均匀。分析可能是制备后经过0.22um微孔滤膜过滤，加强了对脂质体的整粒作用。本实验制备的阿霉素脂质体带负电，其Zata电位为-5.78mV。　　 2、本实验制备的脂质微泡冻干粉呈白色疏松粉末状，复溶性好，光镜下，空白脂质囊泡形状圆整、粒径较均匀，无聚集，平均粒径为3.26μm。　　 3、体外超声参数优化结果为:低频超声联合微泡对无细胞毒性，最佳超声强度为0.6W/cm2，超声时间为10s，脂质微泡浓度为5％(V/V)。通过MTT实验和流式细胞仪检测结果显示，超声微泡联合药物治疗能有效促进肿瘤细胞对抗肿瘤药物的吸收。　　 4、体内实验证明，不管药物是以游离形式还是以脂质体形式，联合超声微泡治疗后，都会显著提高抗肿瘤作用，尤其是载药脂质体效果更明显。同时，本实验考察了不同超声顺序对肿瘤生长抑制的影响。结果显示，先超声空化再给药，最能显著促进肿瘤细胞对抗肿瘤药物的吸收。　　 结论:超声微泡联合盐酸阿霉素脂质体比单纯应用盐酸阿霉素脂质体抗肿瘤效果好，超声微泡联合盐酸阿霉素脂质体通过空化效应，可以有效地促进肿瘤细胞对药物的吸收，提高抗肿瘤效果。这种联合超声空化的治疗方法有望成为一种新的肿瘤化疗方法。本论文设计了一系列实验，优化了各项超声参数，通过体内外实验验证了这种给药系统在肿瘤治疗方面发挥的作用，提供了一种便捷的超声介导的肿瘤治疗方法。本文根据体内外实验数据结果，得到了一套安全有效的用于治疗肿瘤的超声参数，有望将超声微泡介导技术应用于临床治疗。