维生素D对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的影响

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目的:探讨维生素D(vitamin D,VD)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的影响及其可能的机制。方法:将C57BL/6小鼠按照随机数表法分成(n=15):对照组、LPS组、维生素D补充组(VD+LPS组)。利用LPS构建小鼠急性肺损伤模型前,VD+LPS组予25μg/kg灌胃补充3剂1,25二羟维生素D3;对照组以及LPS组予相同体积0.1%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)灌胃。气管插管予以3 mg/kg LPS构建小鼠急性肺损伤模型,造模后2 d处死小鼠。检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白浓度、细胞总数和中性粒细胞比例。利用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测BALF中白介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)以及白介素17A(interleukin-17A,IL-17A)水平。HE染色观察小鼠肺组织病理改变情况,检测肺组织湿/干质量比(wet to dry ratio,W/D)评估肺组织的水肿情况,流式细胞术测肺组织中辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17)比例。实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)及蛋白印迹实验(western blot,WB)检测Th17细胞的特征性转录因子维甲酸相关孤核受体γt(retinoic acid-related orphan receptorγt,RORγt)表达水平。结果:对小鼠补充维生素D后能明显减轻LPS造模引起的肺损伤的严重程度。与LPS组相比,VD+LPS组的BALF蛋白浓度、细胞总数以及中性粒细胞比例降低。相对于LPS组,VD+LPS组BALF中IL-17A、IL-6和TNF-α水平明显降低。与LPS组比较,VD+LPS组肺部Th17细胞比例降低,RORγt核酸及蛋白表达水平显著下降。结论:维生素D可能通过抑制Th17细胞介导的炎症反应以减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤。
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