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目的:探讨牙本质在酸蚀-冲洗和自酸蚀两种粘结体系中MMP-2和MMP-9在抑制剂作用下的表达情况,应用酶谱法分析二者在即刻和老化粘结中的活性水平,为临床应用基质金属蛋白酶抑制剂提高粘结效果提供实验性依据。方法:收集20颗成人新鲜离体第三磨牙,液氮冷却下将其研磨为牙本质粉。模拟口内条件,将牙本质粉进行自酸蚀粘结(Single Bond Universal)和酸蚀-冲洗粘结35%磷酸凝胶+ Adpter Single Bond 2)处理。以不进行任何处理的牙本质粉为阴性对照组;以只进行酸蚀处理的牙本质粉为阳性对照组;以只进行粘结处理的牙本质粉为空白对照组;在粘结过程中使用基质金属蛋白酶抑制剂氯己定(clorhexidine,CHX)和米诺环素(minocyline,MI)预处理作为实验组,将其标记为CHX预处理组和MI预处理组。在以上条件基础上使用10%次氯酸钠进行牙本质老化,并分别标记为空白老化对照组、CHX预处理组和MI预处理老化组。采用明胶酶谱法进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,孵育染色脱色后,用凝胶图像分析系统分析条带,以阴性对照组条带相对灰度值为1,将相对应条带灰度值比值作为评价指标。结果:在酸蚀-冲洗粘结条件下,与空白对照组比较,CHX预处理组和MI预处理组牙本质粉中MMP-2水平降低(P<0.05);与空白老化对照组比较,CHX预处理老化组与MI预处理老化组牙本质粉中MMP-2水平降低(P<0.05),且CHX预处理组与MI预处理组二者表达水平无统计学差异。在自酸蚀粘结条件下,与空白对照组比较,CHX预处理组牙本质粉中MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05),MI预处理组牙本质粉中MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05);与空白老化对照组比较,CHX预处理老化组牙本质粉中MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05),MI预处理老化组牙本质粉中MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05),MI预处理老化组MMP-2表达水平低于CHX预处理老化组(P<0.05)。在酸蚀-冲洗粘结条件下,CHX与MI对于MMP-2的两种形式在即刻粘结条件与老化粘结条件下的抑制作用无统计学差异(P>0.05);在自酸蚀粘结老化条件下,MI对于MMP-2表达水平的抑制作用优于CHX(P<0.05)。结论:1.自酸蚀粘结和酸蚀-冲洗粘结两种粘结方式都会不同程度激活牙本质中MMP-2和MMP-9,从而降低粘结强度。2.在两种粘结方式中,CHX和MI两种基质金属蛋白酶抑制剂能够在即刻粘结和老化粘结条件下抑制MMP-2和MMP-9的活性,达到提高粘结强度和粘结耐久性的目的。