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目的:研究核因子E2相关因子2（NRF2）-抗氧化应答元件（ARE）信号通路在过氧化氢（H2O2）致小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1）分化损伤中的作用;观察白藜芦醇（Res）的干预影响并探讨其可能机制。方法:1.CCK-8法检测不同浓度H2O2对MC3T3-E1细胞存活率的影响后分为对照（NC）组、200μM H2O2（200H）组、400μM H2O2（400H）组,各组干预24h后分别提取m RNA与蛋白,用实时定量PCR（RT-PCR）及Western blot（WB）分别检测细胞1型胶原（COL1）、Runt相关转录因子2（RUNX2）、NRF2、血红素加氧酶-1（HO-1）、NAD（P）H:醌氧化还原酶1（NQO1）、过氧化氢酶（CAT）m RNA及蛋白表达水平。H2O2干预24h后更换培养液诱导成骨分化,第7天行碱性磷酸酶（ALP）染色评估细胞早期成骨分化状态,第21天行茜素红染色评估细胞矿化程度;2.观察抑制NRF2-ARE信号通路对H2O2致成骨分化损伤的影响:分为NC组、400H组、NRF2特异性抑制剂ML385（M）组、400μM H2O2+ML385（400H+M）组,M组及400H+M组用5μM ML385预处理12h,各组在H2O2干预6h时用流式细胞术或荧光显微镜检测各组细胞活性氧（ROS）水平,后按前述方法检测NRF2-ARE信号通路及成骨分化与矿化指标。3.观察Res干预下H2O2致成骨分化损伤及NRF2-ARE信号通路的影响:CCK-8法检测不同浓度Res对细胞存活率的影响后分为NC组、400H组、400μM H2O2+0.1μM Res（400H+0.1R）组、400μM H2O2+1μM Res（400H+1R）组、400μM H2O2+5μM Res（400H+5R）组、400μM H2O2+5μM N-乙酰半胱氨酸（NAC）（400H+5N）组;H2O2干预前行Res或NAC预处理细胞12h,同前述方法检测各组细胞ROS水平,COL1、RUNX2、ALP、骨钙素（OCN）、NRF2、HO-1、NQO1、CAT的m RNA或蛋白表达水平,评估细胞早期成骨分化状态与矿化程度。4.抑制NRF2-ARE信号通路对Res抗H2O2致成骨分化损伤的影响:细胞分为对照组、400H组、400H+1R组、400μM H2O2+1μM Res+5μM ML385（400H+1R+M）组,Res干预前行ML385预处理细胞12h,再行Res及后续H2O2干预,同前述方法检测各组细胞ROS水平、NRF2-ARE信号通路以及成骨分化与矿化指标。结果:1.与NC组相比,H2O2组MC3T3-E1细胞COL1、RUNX2 m RNA与蛋白表达水平显著降低,ALP染色与矿化程度显著减低,NRF2、HO-1、CAT、NQO1mRNA与蛋白表达水平显著升高,400H组较200H组变化更明显（均P＜0.05）;2.与NC组相比,400H组ROS水平显著升高;与400H组相比,400H+M组细胞NRF2、HO-1、NQO1、CAT、COL1、RUNX2 mRNA与蛋白表达水平均显著降低,ALP染色与矿化程度显著减低,ROS水平明显升高（均P＜0.05）;M组较NC组上述指标差异无统计学意义;3.与400H组相比,各Res组与NAC组细胞Col1a1、Runx2 m RNA表达水平显著升高,RUNX2、COL1、ALP、OCN蛋白表达水平显著升高,ALP染色与矿化程度显著增高,ROS水平显著降低（均P＜0.05）,各Res组、NAC组上述指标两两组间差异无统计学意义;与400H组相比,各Res组NRF2、HO-1、CAT、NQO1 m RNA与蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）,400H+5N组显著降低（P＜0.05）,各Res组间差异无统计学意义。4.与400H+1R组相比,400H+1R+M组细胞NRF2、HO-1、NQO1、CAT、RUNX2、COL1、ALP、OCN蛋白或m RNA表达水平显著下调,ALP染色与矿化程度显著增高,细胞ROS水平显著升高（均P＜0.05）。结论:1.H2O2致MC3T3-E1细胞成骨分化损伤过程中伴有NRF2-ARE信号通路的活化,该通路的活化一定程度上减轻了MC3T3-E1细胞成骨分化的氧化损伤,其机制可能与NRF2-ARE信号通路的抗氧化作用有关;2.白藜芦醇可缓解H2O2导致的MC3T3-E1细胞成骨分化损伤,其机制可能与白藜芦醇进一步激活NRF2-ARE信号通路,抑制H2O2诱导的ROS水平升高有关。