婴幼儿配方奶粉对胞内和体内氧化还原状态的影响

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婴幼儿配方奶粉在我国市场巨大,已经成为儿童食品工业中最重要部分。在食用婴幼儿食用配方奶粉的婴幼儿人群中出现的“上火”症状很普遍,但尚未得到彻底的解释和解决。造成该“上火”症状的原因及其背后的科学依据尚不完全明确,有待探究。本研究重点考察了婴幼儿配方奶粉对肠道黏膜及其相关细胞在“氧化应激”和“炎症反应”方面的影响,主要研究内容和结果分述如下:(1)随机选取五种市售一段婴幼儿配方奶粉,以SD大鼠腹腔巨噬细胞和人结肠腺癌系Caco-2细胞为检测模型,测定配方奶粉对细胞增值率的影响浓度范围,并采用经过部分修改的细胞内抗氧化活性测定方法(CAA)、细胞胞质自由基水平测定和线粒体活性氧自由基水平测定等方法对配方奶粉的胞内抗氧化能力进行评价。结果表明,五种市售婴幼儿配方粉在两种细胞的CAA模型中均表现出了胞内抗氧化活性,但抗氧化活力值差异较大,其中3号样品表现出对巨噬细胞和Caco-2细胞氧化应激状态最好的调节能力。婴幼儿配方奶粉对胞浆和线粒体内的自由基调节能力测定结果和CAA结果略有差异,依照自由基浓度的调控方向,五种配方奶粉对巨噬细胞和Caco-2细胞可以分为下调和上调自由基浓度两种作用类型。(2)分别以AAPH和LPS作为诱导剂,考察细胞氧化应激水平和相关炎症介质含量及mRNA表达量之间的关联关系。发现AAPH可以显著增加胞浆内ROS水平,造成细胞氧化损伤,但是未改变iNOS、IL-1β、IL-6等细胞炎症介质的mRNA表达量和分泌量。LPS可以诱发腹腔巨噬细胞iNOS、IL-1β、IL-6对应的mRNA表达量增加,并促进细胞分泌炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及炎症介质NO,但几乎不影响细胞内的ROS浓度。1 mg/mL配方奶粉能够促进巨噬细胞炎症介质mRNA表达并释放相应炎症介质。婴幼儿配方奶粉虽然表现出了胞内抗氧化性,但是在炎症反应中反而能增加炎症介质的表达与释放,表明细胞内氧化还原状态和炎症反应虽然密切相关,但是其氧化应激并未对常见的炎症通路有明确影响。(3)通过体内实验调查了婴幼儿配方奶粉对体内氧化还原状态的影响,结果显示,食用婴幼儿配方奶粉可以显著提高SD大鼠日平均饮水量及平均肛温。在结肠组织匀浆中测得抗氧化酶含量下降,脂质氧化升高,说明结肠组织内氧化还原失衡。结肠组织H&E切片中显示食用婴幼儿配方奶粉后,结肠组织出现局部轻微的炎性细胞浸润但并未侵及黏膜下层,大鼠血清中并未检测到炎症因子,指示食用配方奶粉对于肠道黏膜表面可能造成炎症损伤但并不能造成侵及全身的炎症反应。同时观测了神经-内分泌相关指标,结果显示食用婴幼儿配方奶粉可以增加神经系统兴奋性。本实验研究了婴幼儿配方奶粉对胞内和体内氧化还原状态的影响,期望可以从氧化应激和炎症反应的角度为解决配方奶粉“上火”问题提供思路,为全面了解婴幼儿配方奶粉对婴幼儿身体的影响提供新的指标和实验模型。
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