肾癌血管多普勒超声检测与病理免疫组化对比研究

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目的:本研究应用彩色多普勒血流显像(color Doppler flow imaging,CDFI)、脉冲多普勒(pulsed wave Doppler,PW)和三维彩色血管能量成像(three-dimensional color power angiography,3D-CPA)检测肾癌血供情况及血流动力学参数,定量计测肿瘤血管指数(vascularity index,VI);应用抗CD105单克隆抗体和抗α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)单克隆抗体对术后肾癌组织标本行免疫组织化学染色,计测微血管密度(microvessel density,MVD)和动脉分数(arteriolar fraction,AF),超声检测结果与病理免疫组化结果进行对比,探讨多普勒超声技术定量检测肿瘤血管的病理学基础,评价其在肾癌的术前诊断,手术方案的选择、估测疗效及预后等多方面的临床应用价值。材料与方法:彩超检测36例肾癌(术后病理证实24例肾透明细胞癌,11例肾腺癌,1例肾间变癌),所有病例检查前禁食12小时,取侧卧位。二维灰阶超声常规检查肿瘤部位,观察其位置、大小、形态、内部回声及其与周围组织的关系。测量肿瘤的最长径Dmax与最短径Dmin,以二者平均值作为肿瘤的直径D,按V=4/3π(D/2)3计算肿瘤体积(cm3)。 常规显示下腔静脉、肾静脉,观察其内有无瘤栓、肾门及大血管旁有无淋巴结转移。按<WP=5>Robson法和超声表现对肾癌进行临床分期(Ⅰ~Ⅳ期)。应用CDFI、CPA显示36例肾癌血供情况,观察血管走行、分布情况,PW取样容积2mm,取样线与血流方向夹角<30度,获取清晰血流频谱。测量瘤内、瘤周动脉的收缩期峰值血流速度(peak systolic velocity,PSV)和阻力指数(resistance index,RI),以多次测量的均值作为记录值。在CPA图像清晰状态下,嘱患者屏气,启动3D键对肿瘤血管进行三维重建,图像存储于MO以进一步观察肿瘤血管整体分布,计测3D-CPA肿瘤血管指数VI,即单位体积内的血管条数。肿瘤实际体积按总体积减去瘤内液化坏死区体积计算。术后肿瘤组织切片行免疫组织化学染色,标记物分别为抗CD105单克隆抗体和抗α-SMA单克隆抗体,分析肿瘤组织的微血管形态,分别计测其MVD值(即MVDCD105和MVDα-SMA)及AF值,后者为MVDα-SMA与MVDCD105之比,反映了肿瘤血管中动脉的比例。上述结果进行对比分析。结果:1.二维超声观察36例肾癌病灶,发生于左肾者15例,右肾者21例,大小在3.53×2.7~13.42×8.65(Dmax×Dmin)。临床分期Ⅰ期10例,Ⅱ期17例,Ⅲ期9例。CDFI、PW检测瘤内、瘤周血供情况,其PSV分别为(57.90±43.79)cm/s和(69.54±38.53)cm/s,RI分别为0.51±0.14和0.60±0.12,平均PSV为(69.58±38.05)cm/s,平均RI为0.56±0.11。瘤内RI低于瘤周RI,二者差别有统计学意义(P<0.05)。瘤内及瘤周PSV之间无统计学差别(P>0.05)。肾癌血供丰富,总体呈高速低阻状态。3D-CPA<WP=6>定量指标VI为(0.322±0.193)条/cm3,肾癌不同的病理类型、组织分级和肿瘤Dmax VI比较差异有统计学意义(P<0.05)。2.免疫组化肿瘤组织血管内皮细胞(vessel endothelial cell,VEC)膜及中层平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)分别被抗CD105和抗α-SMA单克隆抗体标记呈棕黄色着色。其阳性染色血管形态及分布差异较大,肿瘤边缘区阳性血管多于内部的阳性血管,且前者血管腔隙较大,相通较多。MVDCD105与肾癌的病理类型、组织分级、肿瘤Dmax有关,各组间差别有统计学意义(P<0.05)。MVDCD105与3D-CPA的VI呈线性相关(r=0.771,P<0.05)。MVDCD105、MVDα-SMA分别为(46.86±19.67)/ 400倍视野和(27.31±11.59)/ 400倍视野,呈良好线性相关(r=0.911,P<0.01)。AF为0.59±0.09,肌性血管占肿瘤新生血管的比例较大。结论:1.肾癌组织中CD105、α-SMA表达强阳性,能较特异、敏感地标记肾癌新生血管,以此计数的MVD及形态学分析反映了肾癌新生血管的状况,MVD与肾癌的病理类型、组织分级有关,可估测肾癌的预后。2.3D-CPA能立体、直观显示肾癌血供,其定量指标VI与肾癌的病理类型、组织分级及肿瘤的大小有关,可作为肾癌疗效判定及预后评价的可靠标准。3.肾癌CDFI、PW检测表现的高速低阻血供及瘤周阻力高于瘤内是其定性诊断的重要特异性指标。4.肿瘤组织病理学特性及肾癌新生血管分布特点是多普<WP=7>勒超声检测肾癌血供,进行定量分析的病理基础。综合应用多普勒超声技术检测肾癌内血管情况,进行定量分析、血供评价,可为临床提供可靠、全面、丰富的信息,以期提高肾癌的诊断治疗水平和术后生存率。
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