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目的: 1.探讨电针百会穴对脑缺血/再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)模型大鼠的神经行为缺损和血脑屏障(Brain Blood Barrier,BBB)通透性的影响; 2.探讨电针百会穴对脑缺血/再灌注后小凹蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)及缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)表达的影响。 方法: 成年雄性SD大鼠随机分为三组:假手术组(Sham)、脑I/R模型组(I/R)、电针治疗组(EA+I/R),除假手术组外,另两组根据不同时间点(6h、24h、72h)分为三个亚组。参照改良Longa线栓法,用线栓阻塞大脑中动脉(Middle cerebralartery occlusion,MCAO)2h后再拔出线栓以制备大鼠脑缺血/再灌注模型,假手术组只分离出血管但不插入线栓。插入线栓2h后参照Longa评分标准进行神经功能缺损评分,1-3分者被筛选为成功模型,并将电针治疗组于术后大鼠清醒时进行电针治疗,各组在各时间点进行神经行为学评分,电针取穴为百会穴,电流频率2/15 HZ,强度1mA,留针30min,每天电针一次;假手术组及模型组不进行任何治疗,而是只固定在实验架上相同的时间,通过酶标仪测定伊文思蓝(Evans Blue,EB)含量评价BBB通透性;2,3,5—氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测定脑梗死面积;免疫荧光、蛋白免疫印迹(Western Blot)方法检测Cav-1、Cx43的表达。 结果: 1.神经功能缺损评分:脑缺血再灌后6h,造模后大鼠神经功能缺损评分开始升高,在24h达到高峰,随后出现下降。模型组与电针治疗组大鼠在脑缺血/再灌注后6h、24h、72h各时间点比较,均有统计学差异(P<0.05);模型组与假手术组在脑缺血/再灌注后6h、24h、72h时间点比较均有统计学意义(P<0.05)。 2.脑组织EB含量:脑缺血/再灌注后6h,模型组及电针治疗组大鼠术侧脑组织EB含量开始升高,在24h达到高峰,随后开始下降。模型组与电针治疗组大鼠在缺血/再灌注后6h、24h、72h时间点比较,均有统计学差异(P<0.05);模型组与假手术组在脑缺血/再灌注后6h、24h、72h时间点比较均有统计学意义(P<0.05)。 3.Cav-1的表达:Western Blot及免疫荧光检测显示脑缺血/再灌注后6h,模型组大鼠Cav-1的表达开始下降,在24h达到最低值,随后出现上升。模型组与电针治疗组大鼠在脑缺血/再灌注后6h、24h、72h时间点比较均有统计学意义(P<0.05);模型组与假手术组在脑出缺血/再灌注后6h、24h、72h时间点比较均有统计学意义(P<0.05)。 4.Cx43的表达:在脑缺血/再灌注后6h,模型组大鼠Cx43表达量开始升高,之后一直保持在高水平上,72h升高最明显。模型组与电针治疗组大鼠在6h、24h、72h时间点比较均有统计学意义(P<0.05);模型组与假手术组在脑缺血/再灌注后6h、24h、72h时间点比较均有统计学意义(P<0.05)。 结论: 1.在局灶性脑缺血/再灌注模型中,其神经功能缺损评分升高,脑组织EB含量升高,梗死灶周脑组织、纹状体及海马组织内Cav-1的表达降低、Cx43的表达升高; 2.电针百会穴可改善急性局灶性脑缺血/再灌注模型神经功能缺损症状,降低BBB通透性,增加缺血灶周脑组织、纹状体及海马组织内Cav-1的表达和降低Cx43的表达; 3.电针百会穴对脑缺血/再灌注的大鼠有脑保护作用,其机制可能是同时调节Cav-1和Cx43的表达相关。